摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-31页 |
·GPCR家族及生理意义 | 第11-18页 |
·GPCR各家族的介绍 | 第12-17页 |
·Rhodopsin家族 | 第12-15页 |
·Adhesion家族 | 第15页 |
·Secretin家族 | 第15-16页 |
·Glutamate家族 | 第16页 |
·FrizzledlTas2家族 | 第16-17页 |
·GPCR家族受体的共性及其信号通路 | 第17-18页 |
·GPCR结构及样品制备方法 | 第18-29页 |
·GPCR蛋白质的结构-功能关系 | 第18页 |
·GPCR的结构解析方法 | 第18-24页 |
·电子显微镜技术 | 第18-20页 |
·原子力显微镜技术 | 第20页 |
·傅里叶变换红外光谱法 | 第20-21页 |
·X-射线晶体衍射法 | 第21-22页 |
·固体核磁共振法 | 第22-24页 |
·GPCR家族蛋白质在激活过程中的结构性关键变化 | 第24-25页 |
·GPCR蛋白质的表达体系及制备方法 | 第25-29页 |
·大肠杆菌表达体系 | 第26-27页 |
·酵母表达体系 | 第27页 |
·昆虫表达体系 | 第27-28页 |
·哺乳动物表达体系 | 第28-29页 |
·无细胞表达体系 | 第29页 |
·本工作的研究内容及意义 | 第29-31页 |
第二章 293S GnTI~-细胞高密度悬浮生长的培养条件及营养成分优化 | 第31-39页 |
·293S GnTI~-细胞的简介及优势 | 第31页 |
·293S GnTI~-细胞高密度悬浮生长的培养条件及营养成分优化 | 第31-39页 |
·材料与仪器 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·实验结果与讨论 | 第34-39页 |
·293S GnTI~-细胞高密度悬浮生长的培养条件优化 | 第34-36页 |
·293S GnTI~-细胞在透析血清中培养时营养物质的回添 | 第36-39页 |
第三章 人源视蛋白(Opsin)的高产稳定细胞株筛选 | 第39-55页 |
·Opsin的重要意义以及研究现状 | 第39页 |
·稳定293S GnTI~-细胞株的构建与筛选 | 第39-53页 |
·材料与仪器 | 第39-41页 |
·实验方法 | 第41-44页 |
·实验结果与讨论 | 第44-53页 |
·真核表达质粒pcDNA4/TO-Opsin的构建 | 第44-45页 |
·真核表达质粒pcDNA4/TO-Opsin-Neo~+的构建 | 第45-49页 |
·在293S GnTI~-细胞中引入四环素调控系统和Opsin基因 | 第49-52页 |
·高产Opsin的293S GATI~-细胞株亚克隆筛选 | 第52-53页 |
·高产Opsin稳定293S GnTI~-细胞株悬浮培养与野生细胞的对比 | 第53-55页 |
第四章 人源CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)的高产稳定细胞株筛选 | 第55-62页 |
·CX3CR1的重要意义以及研究现状 | 第55页 |
·稳定293S GnTI~-细胞株的构建与筛选 | 第55-62页 |
·材料与仪器 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-57页 |
·实验结果与讨论 | 第57-62页 |
第五章 人源β-3肾上腺素受体(ADRB3)的高产稳定细胞株筛选 | 第62-69页 |
·ADRB3的重要意义以及研究现状 | 第62页 |
·稳定293S GnTI~-细胞株的构建与筛选 | 第62-69页 |
·材料与仪器 | 第62页 |
·实验方法 | 第62-64页 |
·实验结果与讨论 | 第64-69页 |
第六章 全文总结与展望 | 第69-71页 |
攻读硕士学位期间科研工作成果 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80页 |