A型流感病毒NS1蛋白磷酸化研究
| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-40页 |
| 1 流感病毒研究进展 | 第10-22页 |
| ·流感病毒的分子生物学特征 | 第11-12页 |
| ·流感病毒复制周期 | 第12-21页 |
| ·抗流感药物和流感疫苗研究现状 | 第21-22页 |
| 2 NS1蛋白 | 第22-30页 |
| ·NS基因及其编码产物 | 第22页 |
| ·NS1蛋白的结构 | 第22-23页 |
| ·NS1蛋白合成和细胞内定位 | 第23-24页 |
| ·NS1蛋白的功能 | 第24-29页 |
| ·NS1蛋白憐酸化研究进展 | 第29页 |
| ·NS1研究的应用 | 第29-30页 |
| 3 干扰素概述 | 第30-40页 |
| ·干扰素的结构与受体 | 第31-33页 |
| ·干扰素的产生 | 第33-36页 |
| ·干扰素的下游信号通路 | 第36-37页 |
| ·干扰素诱导基因介导的抗病毒机制 | 第37-38页 |
| ·干扰素的应用 | 第38-39页 |
| ·流感病毒对干扰素信号转导过程的拮抗作用 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-56页 |
| 1 实验材料 | 第40-43页 |
| ·细胞、流感病毒毒株 | 第40页 |
| ·质粒 | 第40页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·常用缓冲液及其他溶液 | 第40-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-56页 |
| ·质粒的构建 | 第43-47页 |
| ·点突变载体的构建 | 第47-48页 |
| ·蛋白质的表达与纯化 | 第48-49页 |
| ·western blot免疫印迹分析 | 第49-50页 |
| ·蛋白质银染检测 | 第50页 |
| ·RT-PCR | 第50-52页 |
| ·细胞转染 | 第52页 |
| ·病毒感染实验 | 第52-53页 |
| ·荧光共定位 | 第53页 |
| ·luciferase实验 | 第53-55页 |
| ·噬班实验 | 第55-56页 |
| 第三章 结果与分析 | 第56-63页 |
| ·鉴定NS1蛋白上的磷酸化位点 | 第56页 |
| ·磷酸化位点的反向遗传病毒拯救 | 第56-57页 |
| ·T80E、S83D病毒复制效率减弱 | 第57-58页 |
| ·蛋白的磷酸化修饰没有明显改变NS1的细胞定位 | 第58-59页 |
| ·T80E对干扰素抑制效果减弱 | 第59-60页 |
| ·NS1磷酸化修饰后与RNA的亲和力发生改变 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
