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基于新型荧光探针测定拟干酪乳酸杆菌胞内NADH水平研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第1章 前言第9-23页
   ·乳酸概述第9-12页
     ·乳酸简介第9页
     ·乳酸的生产方法第9-11页
     ·乳酸及其衍生物的应用第11-12页
   ·乳酸菌简介及其基因工程发展第12-15页
     ·乳酸菌简介第12-13页
     ·乳酸菌的发酵代谢机理第13-14页
     ·乳酸菌基因工程发展现状第14-15页
   ·NADH概述第15-21页
     ·NADH的理化性质第15-16页
     ·NADH的生物合成途径第16-17页
     ·细胞中NAD~+/NADH的含量和状态第17页
     ·工业微生物中NADH代谢调控研究第17-19页
     ·常用的NADH检测方法第19-21页
   ·本课题研究的主要内容及研究意义第21-23页
第2章 材料与方法第23-34页
   ·材料第23-27页
     ·质粒、菌株和引物第23-24页
     ·实验试剂第24-25页
     ·实验仪器第25-26页
     ·培养基第26-27页
     ·溶液第27页
   ·实验方法第27-34页
     ·分子生物学方法第27-31页
     ·Lactobacillus paracasei发酵培养方法第31-32页
     ·分析及测定方法第32-34页
第3章 拟干酪乳杆菌中NADH荧光探针的构建第34-45页
   ·引言第34-36页
   ·Frex和cpYFP基因在E.coli中的克隆与表达第36-44页
     ·PCR扩增Frex和cpYFP基因第36-37页
     ·Frex和cpYFP基因连接载体pMD~R19T并转化大肠杆菌(E.coil)DH5α第37-38页
     ·pMG36e-Frex和pMG36e-cpYFP重组质粒的构建第38-39页
     ·pMG36e-Frex和pMG36e-cpYFP重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)Top10第39-40页
     ·pMG36e-Frex和pMG36e-cpYFP重组质粒序列分析第40-44页
   ·Frex和cpYFP基因在拟干酪乳杆菌中表达第44页
   ·本章小结第44-45页
第4章 拟干酪乳杆菌中新型NADH荧光探针的的应用条件探索第45-53页
   ·引言第45页
   ·拟干酪乳杆菌重组菌株的培养条件研究第45-49页
     ·培养条件及培养基优化第45-47页
     ·5L罐培养第47-49页
   ·新型NADH荧光探针的pH适用范围探索第49-50页
   ·新型NADH荧光探针检测NADH的饱和度探索第50-51页
   ·讨论第51-52页
   ·本章小结第52-53页
第5章 拟干酪乳杆菌中新型NADH荧光探针的应用研究第53-64页
   ·引言第53-54页
   ·渗透压对于Lactobacillus paracasei发酵生产L-乳酸的影响第54-59页
     ·渗透压对于L.paracasei生产L-乳酸的影响第54-55页
     ·渗透压保护剂的选择第55-56页
     ·5L罐验证脯氨酸对于L.paracasei发酵生产L-乳酸的作用第56-59页
   ·拟干酪乳杆菌中新型NADH荧光探针的应用第59-62页
   ·本章小结第62-64页
第6章 总结与展望第64-67页
   ·总结第64-65页
   ·展望第65-67页
参考文献第67-74页
致谢第74页

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