中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-30页 |
第一章 引言 | 第30-35页 |
第二章 小鼠肾脏发育形态学变化和Robo2在肾脏发育过程中的表达情况 | 第35-64页 |
第一节 前言 | 第35-38页 |
第二节 实验材料、主要试剂和仪器 | 第38-42页 |
·实验动物 | 第38页 |
·实验试剂 | 第38-40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·其他材料 | 第41-42页 |
第三节 实验方法 | 第42-49页 |
·实验动物处理及标本留取 | 第42-43页 |
·PAS 染色 | 第43-44页 |
·RNA 提取和 cDNA 合成 | 第44-47页 |
·实时定量 RT-PCR 检测 | 第47页 |
·冰冻切片免疫荧光染色 | 第47-49页 |
第四节 实验结果 | 第49-56页 |
·小鼠肾脏发育各阶段的形态学变化 | 第49-52页 |
·小鼠肾脏发育各阶段 Robo2 mRNA 的表达水平变化 | 第52页 |
·小鼠肾脏发育各阶段 Robo2 的免疫荧光染色结果 | 第52-56页 |
第五节 讨论 | 第56-62页 |
第六节 小结 | 第62-64页 |
第三章 Robo2 过度表达导致后肾间充质聚集和输尿管芽分支发生缺陷 | 第64-95页 |
第一节 前言 | 第64-66页 |
第二节 实验材料、主要试剂和仪器 | 第66-70页 |
·实验动物 | 第66页 |
·实验试剂 | 第66-68页 |
·质粒 | 第68页 |
·主要仪器 | 第68-69页 |
·其他材料 | 第69-70页 |
第三节 实验方法 | 第70-81页 |
·质粒转化、扩增和提取 | 第70-76页 |
·显微分离小鼠胚胎肾脏 | 第76页 |
·胚肾显微注射、电转染和培养 | 第76-78页 |
·体外培养胚肾的免疫荧光染色 | 第78-79页 |
·体外培养胚肾的增殖和凋亡染色 | 第79-80页 |
·统计学处理 | 第80-81页 |
第四节 实验结果 | 第81-89页 |
·体外构建胚胎肾脏后肾间充质过表达 Robo2 模型 | 第81-82页 |
·体外 Robo2 过度表达后输尿管芽分支减少,肾小球数目减少 | 第82-85页 |
·体外 Robo2 过度表达引起后肾间充质细胞减少 | 第85-86页 |
·体外 Robo2 过度表达后肾间充质细胞增殖、凋亡无异常 | 第86-89页 |
第五节 讨论 | 第89-94页 |
第六节 小结 | 第94-95页 |
第四章 Robo2 基因缺陷导致肾脏和输尿管发育异常 | 第95-139页 |
第一节 前言 | 第95-98页 |
第二节 实验材料、主要试剂和仪器 | 第98-104页 |
·实验动物 | 第98页 |
·实验试剂 | 第98-100页 |
·主要仪器 | 第100-102页 |
·其他材料 | 第102-104页 |
第三节 实验方法 | 第104-117页 |
·冰冻组织留取及冰冻切片免疫荧光和凋亡染色 | 第104-106页 |
·石蜡组织留取及石蜡 PAS 染色 | 第106-108页 |
·RNA 提取、cDNA 合成和实时定量 RT-PCR 检测 | 第108-111页 |
·胚胎组织体外培养及免疫荧光染色 | 第111-113页 |
·Robo2 基因敲除小鼠的基因型鉴定 | 第113-114页 |
·质粒转化、扩增和提取 | 第114-115页 |
·显微注射、电转染质粒和体外培养 | 第115-116页 |
·统计学处理 | 第116-117页 |
第四节 实验结果 | 第117-129页 |
·Robo2 在输尿管和膀胱三角区表达 | 第117-119页 |
·Robo2 基因敲除小鼠肾脏和输尿管发育异常 | 第119-122页 |
·输尿管长度的发育与肾脏、膀胱的关系 | 第122-124页 |
·体外膀胱三角区转染RNAi-Robo2对输尿管长度发育的影响 | 第124-127页 |
·Robo2 敲除小鼠 CND 凋亡情况 | 第127-129页 |
第五节 讨论 | 第129-137页 |
第六节 小结 | 第137-139页 |
第五章 全文总结 | 第139-141页 |
第六章 综述 | 第141-185页 |
第一节 输尿管芽分支形态发生 | 第144-153页 |
·输尿管芽的萌出 | 第145-147页 |
·UB 分支和延长的细胞行为 | 第147-151页 |
·UB 头和茎的区域分化 | 第151-153页 |
第二节 输尿管芽形态发生的调控因素 | 第153-182页 |
·输尿管芽萌出的调控因素 | 第153-166页 |
·UB 分支形成的调控因素 | 第166-174页 |
·Ret 的下游信号 | 第174-178页 |
·肾素血管紧张素系统 | 第178-182页 |
第三节 UB 分支的终止 | 第182-185页 |
参考文献 | 第185-241页 |
致谢 | 第241-243页 |
附录 试剂配制 | 第243-247页 |
个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第247-251页 |