摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
·叶螨的抗药性研究 | 第10-11页 |
·二斑叶螨对螺螨酯抗性分子机理研究 | 第11-16页 |
·靶标抗性—乙酰辅酶A羧化酶 | 第11-12页 |
·代谢抗性 | 第12-16页 |
·基因定量表达的检测技术 | 第16-17页 |
·研究目的和意义 | 第17-19页 |
第二章 二斑叶螨抗螺螨酯种群解毒酶系生理生化分析 | 第19-28页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·供试二斑叶螨 | 第19页 |
·供试药剂和试剂 | 第19-20页 |
·供试仪器 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-25页 |
·酶源的制备 | 第20页 |
·蛋白质标准曲线及含量测定 | 第20-21页 |
·羧酸酯酶(CarE)活性测定 | 第21-22页 |
·谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性测定 | 第22-23页 |
·多功能氧化酶(MFOs)活性测定 | 第23-25页 |
·结果与分析 | 第25-27页 |
·蛋白质标准曲线 | 第25页 |
·α-萘酚标准曲线 | 第25-26页 |
·对硝基苯酚标准曲线 | 第26页 |
·二斑叶螨螺螨酯敏感和螺螨酯抗性种群解毒酶活性变化分析 | 第26-27页 |
·小结 | 第27-28页 |
第三章 二斑叶螨乙酰辅酶A羧化酶基因克隆与序列分析 | 第28-42页 |
·材料与方法 | 第28-36页 |
·供试螨类 | 第28页 |
·主要试剂盒及仪器 | 第28-30页 |
·常用试剂配制 | 第30页 |
·总RNA提取 | 第30-31页 |
·第一链cDNA的合成 | 第31-32页 |
·引物设计 | 第32-33页 |
·PCR扩增反应 | 第33-34页 |
·PCR产物的克隆与测序 | 第34-36页 |
·序列分析 | 第36页 |
·结果与分析28 | 第36-40页 |
·总RNA提取28 | 第36页 |
·乙酰辅酶A羧化酶基因克隆及序列分析28 | 第36-40页 |
·系统发育树的构建及同源性分析 | 第40页 |
·小结 | 第40-42页 |
第四章 二斑叶螨GSTs基因克隆与序列分析 | 第42-50页 |
·材料与方法 | 第42-43页 |
·引物设计 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-49页 |
·GSTs基因cDNA片段的扩增 | 第43页 |
·GSTs基因序列分析 | 第43-45页 |
·GSTs基因的二级结构与活性位点分析 | 第45-46页 |
·GSTs基因系统发育树的构建及同源性分析 | 第46-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第五章 二斑叶螨P450及酯酶基因克隆与序列分析 | 第50-57页 |
·材料与方法 | 第50页 |
·引物设计 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-55页 |
·P450及酯酶基因cDNA片段的扩增 | 第50-51页 |
·P450及酯酶基因全长序列 | 第51-53页 |
·P450及酯酶基因同源性分析 | 第53-54页 |
·系统发育树的构建 | 第54-55页 |
·小结 | 第55-57页 |
第六章 二斑叶螨不同种群基因表达模式分析 | 第57-62页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·主要试剂(盒)与仪器 | 第57页 |
·主要试剂(盒)与仪器 | 第57页 |
·引物设计 | 第57-58页 |
·内参引物扩增效率及熔解曲线分析 | 第58-59页 |
·数据分析 | 第59页 |
·结果与分析 | 第59-60页 |
·二斑叶螨不同种群不同基因相对表达模式 | 第59-60页 |
·小结 | 第60-62页 |
第七章 结论与创新点 | 第62-65页 |
·主要结论 | 第62-63页 |
·存在问题 | 第63页 |
·创新点 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
个人简介 | 第73-74页 |
导师简介 | 第74-75页 |