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球等鞭金藻中烯酰-ACP还原酶基因的克隆、转录分析以及环境胁迫下脂肪酸分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-24页
   ·球等鞭金藻 I. galbana 形态结构第12-13页
   ·球等鞭金藻的研究现状及应用前景第13-16页
     ·水产动物饵料第14页
     ·生产多不饱和脂肪酸(PUFAs)第14-15页
     ·抗肿瘤药物第15页
     ·球等鞭金藻在能源和污水处理方面的应用第15-16页
   ·生物柴油第16-17页
     ·生物柴油概述第16页
     ·生物柴油特性第16-17页
     ·微藻生物柴油第17页
   ·环境条件对球等鞭金藻的生长及生化成分的影响第17-20页
     ·氮、磷、硅等营养因子的影响第17-19页
       ·氮第17-18页
       ·磷第18-19页
       ·硅第19页
       ·其他元素第19页
     ·环境因素对微藻生长及油脂积累的影响第19-20页
   ·烯酰-ACP 还原酶概述第20-22页
     ·烯酰-ACP 还原酶的功能第20-21页
     ·烯酰-ACP 还原酶的种类第21-22页
     ·烯酰-ACP 还原酶的研究现状第22页
   ·本研究的目的及其意义第22-24页
     ·研究目的第22-23页
     ·研究意义第23-24页
2 材料与方法第24-45页
   ·实验材料第24页
     ·菌株、质粒第24页
     ·酶与各种生化试剂第24页
   ·实验方法第24-45页
     ·球等鞭金藻的保存与培养第24-26页
       ·f/2 培养基第25页
       ·球等鞭金藻的保存第25-26页
       ·球等鞭金藻的培养第26页
     ·球等鞭金藻 DNA 和 RNA 的提取第26-28页
       ·球等鞭金藻藻体的收集第26页
       ·球等鞭金藻 DNA 的提取第26-27页
       ·球等鞭金藻 RNA 的提取第27-28页
     ·cDNA 合成第28-29页
     ·引物设计第29页
     ·5′RACE 反应第29-33页
     ·3′RACE 反应第33-35页
     ·IgENR DNA 序列扩增第35-36页
     ·基因步移第36-37页
     ·PCR 产物纯化第37-38页
     ·目的片段与质粒 DNA 的连接第38页
     ·感受态细胞的制备第38-39页
     ·质粒 DNA 向大肠杆菌中转化第39页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定及测序第39-40页
     ·生物信息学分析第40页
     ·荧光定量第40-41页
     ·球等鞭金藻的尼罗红染色第41页
     ·球等鞭金藻总脂的提取第41-42页
     ·球等鞭金藻脂肪酸的甲酯化第42-43页
     ·GC-MS 测定脂肪酸第43页
     ·脂肪酸结果分析第43-45页
3 结果与分析第45-67页
   ·IgENR 基因全长的获得第45-48页
     ·球等鞭金藻 RNA 提取结果第45页
     ·球等鞭金藻 IgENR 基因序列全长的获得第45-46页
     ·IgENR DNA 序列克隆第46-47页
     ·IgENR 基因步移第47-48页
   ·生物信息学分析 IgENR 基因序列第48-56页
     ·IgENR 基因核酸序列与预测的氨基酸序列第48-49页
     ·IgENR 基因内含子与外显子第49-51页
     ·球等鞭金藻 IgENR 蛋白质特性分析第51页
     ·球等鞭金藻 IgENR 蛋白质的亚细胞定位第51-52页
     ·IgENR 蛋白的跨膜区预测分析第52页
     ·IgENR 氨基酸序列的多序列比对第52-53页
     ·IgENR 的系统进化树第53-56页
   ·荧光定量 PCR 分析不同条件下 IgENR 的表达第56-60页
     ·扩增产物特异性检测结果第56-57页
     ·球等鞭金藻 IgENR 基因在不同温度下的表达第57-58页
     ·球等鞭金藻 IgENR 基因在不同氮浓度下的表达第58-60页
   ·球等鞭金藻油脂含量第60-67页
     ·球等鞭金藻生长的标准曲线第60-61页
     ·微藻细胞尼罗红染色镜检结果第61-62页
     ·不同培养条件下细胞密度油脂动态积累检测第62-67页
4 讨论第67-70页
5 结论第70-71页
参考文献第71-78页
致谢第78-79页
攻读学位期间发表论文情况第79页

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