| 目录 | 第1-7页 |
| 英文缩略词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1. 引言 | 第12-17页 |
| 2. 材料和方法 | 第17-40页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| ·实验材料与试剂 | 第18-23页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·细胞株 | 第18页 |
| ·主要实验试剂 | 第18页 |
| ·主要实验设备及耗材 | 第18-19页 |
| ·主要实验试剂的配制 | 第19-23页 |
| ·实验方法 | 第23-40页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第23-25页 |
| ·MEF的原代培养 | 第25-26页 |
| ·MEF细胞的传代及丝裂霉素处理 | 第26-27页 |
| ·mES细胞传代 | 第27页 |
| ·mES细胞的分化-悬滴法 | 第27-28页 |
| ·mEVs的原代分离培养 | 第28-30页 |
| ·共培养处理 | 第30页 |
| ·划痕负载染料迁移实验(SLDT) | 第30页 |
| ·RNA的提取与逆转录 | 第30-32页 |
| ·多聚酶链反应 | 第32-34页 |
| ·蛋白的提取 | 第34-35页 |
| ·BCA法测蛋白浓度 | 第35-36页 |
| ·Western Blot | 第36-38页 |
| ·免疫荧光染色 | 第38-39页 |
| ·分化细胞的荧光标记 | 第39页 |
| ·流式细胞术 | 第39页 |
| ·统计学分析 | 第39-40页 |
| 3. 实验结果 | 第40-55页 |
| ·MEF细胞的形态学观察 | 第40-41页 |
| ·mES的形态学观察 | 第41-42页 |
| ·分化细胞的形态学观察 | 第42-43页 |
| ·EBs跳动比率的观察 | 第43-44页 |
| ·EBs跳动节律的观察 | 第44-45页 |
| ·mES分化细胞cTNT的表达 | 第45-47页 |
| ·细胞的标记示踪 | 第47页 |
| ·流式细胞术检测 | 第47页 |
| ·缝隙连接功能测定 | 第47-50页 |
| ·Cx43的mRNA表达 | 第50-51页 |
| ·Cx43的蛋白表达 | 第51-53页 |
| ·心肌细胞间Cx43的分布 | 第53-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-59页 |
| ·共培养组与对照组均能分化出自发跳动的心肌细胞 | 第55页 |
| ·共培养组与对照组分化心肌细胞数量并无明显差异 | 第55页 |
| ·共培养组分化表达cTNT的细胞是由胚胎干细胞分化而来 | 第55-56页 |
| ·共培养组分化的心肌细胞间缝隙连接传导功能增强 | 第56页 |
| ·共培养组分化细胞Cx43的表达高于对照组 | 第56-57页 |
| ·共培养组分化的心肌细胞Cx43规则排列,位于细胞间连接处 | 第57-59页 |
| 5. 结论 | 第59-60页 |
| 6. 工作展望 | 第60-61页 |
| 7. 参考文献 | 第61-66页 |
| 8. 综述 | 第66-85页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 9. 附录 | 第85-89页 |
| 10. 致谢 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90页 |