ARC蛋白对胰岛素诱发的肉鸡心肌细胞肥大c-myc基因表达的影响

摘要	第1-10页
ABSTRACT	第10-12页
缩略词表	第12-13页
第一部分 文献综述	第13-22页
1 ARC蛋白的研究进展	第13-17页
·ARC蛋白发现	第13页
·ARC蛋白结构	第13-14页
·ARC蛋白的表达及定位	第14页
·ARC蛋白在组织中的表达	第14页
·ARC蛋白的细胞定位	第14页
·ARC蛋白抗凋亡和肥大的作用	第14-16页
·ARC蛋白的作用	第16页
·ARC在心脏疾病中的作用	第16-17页
2 c-myc的研究进展	第17-19页
·原癌基因的发展史	第17-18页
·c-myc的结构及定位	第18页
·c-myc基因的功能和作用	第18-19页
3 胰岛素诱导心肌肥大研究进展	第19-22页
·心肌肥大的研究进展	第19-20页
·胰岛素诱导心肌肥大研究进展	第20-22页
第二部分 实验研究部分	第22-63页
1 前言	第22-23页
2 实验材料	第23-27页
·实验动物	第23页
·主要试剂及耗材	第23页
·主要仪器设备	第23-24页
·主要溶液及配置	第24-27页
·DMEM培养液的配制	第24-25页
·PBS平衡盐溶液的配制和消毒	第25页
·D-Hanks溶液配置	第25页
·0.04%胶原酶Ⅱ消化液的配制和灭菌	第25页
·4%中性多聚甲醛固定液的配置	第25-26页
·LB培养基的配置	第26-27页
3 实验方法	第27-43页
·鸡胚心肌细胞的培养	第27-28页
·胶原酶消化法	第27-28页
·组织块贴壁法	第28页
·心肌细胞免疫组化法鉴定	第28-29页
·鬼笔环肽染细胞骨架	第29页
·质粒构建	第29-35页
·总RNA的提取和ARC基因扩增	第29-31页
·重组表达载体pEGFP-N1-ARC构建	第31-33页
·感受态菌的制备	第33-34页
·重组质粒的转化	第34页
·重组质粒的小量制备	第34-35页
·重组质粒的双酶切鉴定	第35页
·重组质粒的测序鉴定	第35页
·胰岛素诱导心肌细胞的肥大	第35-36页
·实验分组	第35页
·心肌细胞的直径和表面积的测定	第35-36页
·转染	第36-38页
·实验分组	第36页
·转染原理	第36页
·转染过程	第36-37页
·细胞免疫荧光	第37-38页
·RNA的提取与荧光定量PCR	第38-39页
·RNA的提取	第38页
·RT-PCR	第38页
·Real Time-PCR	第38-39页
·蛋白的提取与ELISA	第39-43页
·蛋白的提取	第39-40页
·Commassie蛋白质定量	第40-41页
·ELISA	第41-43页
4 实验结果与分析	第43-56页
·鸡胚心肌细胞培养结果	第43页
·组织块贴壁法	第43页
·胶原酶消化法	第43页
·心肌细胞鬼笔环肽染色结果	第43页
·心肌细胞免疫组化结果	第43-44页
·胰岛素诱导心肌细胞肥大的结果	第44-48页
·质粒的构建	第48-51页
·目的片段的提取	第48页
·重组质粒的双酶切鉴定	第48-50页
·重组质粒的测序鉴定	第50-51页
·PEGFP-N1/ARC脂质体转染	第51页
·RNA的提取与RT-PCR结果	第51-54页
·ELISA实验结果	第54-56页
5 讨论	第56-63页
·重组pEGFP-N1/ARC质粒构建	第56页
·肉鸡心肌细胞的培养鉴定	第56-57页
·胰岛素诱导心肌细胞肥大	第57-60页
·ARC蛋白对肥大的心肌细胞中c-myc的影响	第60-63页
参考文献	第63-70页
致谢	第70-71页
附录	第71页