| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 综述 | 第11-19页 |
| 1 猪圆环病毒2型概述 | 第11-14页 |
| ·病毒的基因组 | 第11页 |
| ·病毒流行概况 | 第11页 |
| ·与PCV2相关疾病及症状 | 第11-13页 |
| ·PCV2的诊断方法 | 第13-14页 |
| ·PCV2的防治 | 第14页 |
| 2 杆状病毒表达系统简介 | 第14-17页 |
| ·杆状病毒 | 第14-15页 |
| ·杆状病毒表达系统的组成 | 第15页 |
| ·构建重组杆状病毒的过程 | 第15页 |
| ·影响外源蛋白表达的因素 | 第15-16页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统的应用 | 第16-17页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
| 第一章 猪圆环病毒2型ORF2基因在昆虫杆状病毒表达系统的表达 | 第19-37页 |
| 1 实验材料 | 第19-23页 |
| ·病毒 | 第19页 |
| ·实验动物及细胞系 | 第19-20页 |
| ·菌株及载体 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验所用培养基及溶液的配制 | 第21-23页 |
| ·分子生物学软件 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-29页 |
| ·质粒pMD18-T-ORF2的构建 | 第23-24页 |
| ·质粒pFastBac~(TM)1-ORF2的构建 | 第24-25页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid-ORF2的构建 | 第25-26页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第26-29页 |
| ·重组杆状病毒的动物免疫试验 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-35页 |
| ·PCV2 ORF2基因的获得 | 第30页 |
| ·pMD18-T-ORF2质粒 | 第30页 |
| ·质粒pFastBac~(TM)1-ORF2 | 第30-31页 |
| ·重组穿梭载体Bacmid-ORF2 | 第31-32页 |
| ·转染细胞的病变 | 第32页 |
| ·野生型杆状病毒(wt.Ac)、重组杆状病毒(reBacmid-Cap)的鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR结果 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE | 第34页 |
| ·免疫小鼠的ELISA抗体 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第二章 猪圆环病毒2型单克隆抗体的制备及其初步应用 | 第37-51页 |
| 1 实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验动物及细胞系 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要器械 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞用培养基的配制 | 第37-38页 |
| 2 方法 | 第38-43页 |
| ·免疫原的制备与免疫 | 第38页 |
| ·细胞融合 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第39-40页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化 | 第40页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第40页 |
| ·腹水的制备 | 第40-41页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-49页 |
| ·重组杆状病毒(reBacmid-Cap)浓缩后的TCID_(50) | 第43页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体特性的鉴定 | 第44-47页 |
| ·单克隆抗体的初步应用 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 全文小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
