| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一部分：ADSCs 的分离、培养、鉴定及 NRG-1/ErbB 通路的检测 | 第13-24页 |
| 1 实验材料 | 第13-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-19页 |
| ·大鼠 ADSCs 的分离、培养 | 第15-16页 |
| ·免疫荧光鉴定 ADSCs | 第16页 |
| ·流式细胞仪鉴定 ADSCs | 第16页 |
| ·RT-PCR 检测 NRG-1 及 ErbB2、ErbB3、ErbB4 mRNA 的表达 | 第16-19页 |
| ·ELISA 检测大鼠 ADSCs 培养上清液中 NRG-1 的含量 | 第19页 |
| 3 结果 | 第19-22页 |
| ·大鼠 ADSCs 生长特点 | 第19-20页 |
| ·免疫荧光鉴定大鼠 ADSCs | 第20页 |
| ·流式细胞仪鉴定大鼠 ADSCs | 第20-22页 |
| ·NRG-1/ErbB 相关基因在大鼠 ADSCs 中的表达 | 第22页 |
| ·ELISA 检测大鼠 ADSCs 培养上清液中 NRG-1 的含量 | 第22页 |
| 4 讨论 | 第22-24页 |
| 第二部分：干预 NRG-1/ErbB 通路对大鼠 ADSCs 向类窦房结细胞分化的影响 | 第24-41页 |
| 1 实验材料 | 第24-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-31页 |
| ·ADSCs 的心肌样分化模型的建立与鉴定 | 第26-27页 |
| ·干预 NRG -1/ErbB 通路对大鼠 ADSCs 心肌样分化的影响 | 第27-28页 |
| ·qRT-PCR 检测起搏相关基因 mRNA 的表达 | 第28-29页 |
| ·Western blot 法检测 TBX3 蛋白的表达差异： | 第29-30页 |
| ·诱导后动作电位的检测 | 第30页 |
| ·统计学分析 | 第30-31页 |
| 3. 实验结果 | 第31-38页 |
| ·大鼠 ADSCs 的心肌样分化 | 第31-32页 |
| ·干预 NRG -1/ErbB 通路后起搏相关基因的表达差异 | 第32-36页 |
| ·Western blot 法检测 TBX3 蛋白的表达 | 第36-37页 |
| ·诱导后动作电位特征 | 第37-38页 |
| 4. 讨论 | 第38-41页 |
| 第三部分：用超极化激活环核苷酸门控离子通道-2（HCN2）基因修饰的 ADSCs构建生物起搏器 | 第41-50页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| 2 实验方法 | 第42-44页 |
| ·hHCN2 基因过表达慢病毒载体构建 | 第42页 |
| ·hHCN2 基因的转染 | 第42页 |
| ·qRT-PCR 法检测 hHCN2 mRNA 的表达 | 第42-43页 |
| ·免疫荧光检测 hHCN2 蛋白的表达 | 第43页 |
| ·Western blot 法检测 hHCN2 蛋白的表达 | 第43页 |
| ·hHCN2-ADSCs 内向电流的检测 | 第43页 |
| ·hHCN2 基因转染 ADSC 后与心室肌细胞共培养 | 第43-44页 |
| ·统计学分析 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-48页 |
| ·hHCN2 基因过表达慢病毒载体的鉴定 | 第44页 |
| ·qRT-PCR 检测 hHCN2 mRNA 的表达 | 第44-46页 |
| ·免疫荧光观察结果 | 第46页 |
| ·Western blot 检测结果 | 第46页 |
| ·内向电流的检测 | 第46-47页 |
| ·hHCN2-ADSCs 起搏功能的观察 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 全文小结 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第57-58页 |
| 综述 | 第58-66页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
