致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-36页 |
·鱼类性别决定 | 第12-15页 |
·遗传型性别决定 | 第12-13页 |
·环境型性别决定 | 第13-15页 |
·环境影响的遗传型性别决定 | 第15页 |
·鱼类的性腺分化和发育 | 第15-17页 |
·鱼类的性腺分化 | 第15-16页 |
·鱼类的性腺发育 | 第16-17页 |
·鱼类性别决定与性腺分化发育相关基因 | 第17-33页 |
·重要性别相关基因 | 第19-24页 |
·芳香化酶基因 | 第19-20页 |
·dmrt 家族 | 第20-21页 |
·sox 基因 | 第21-22页 |
·amh 基因 | 第22页 |
·foxl2 基因 | 第22-23页 |
·ftz-f1 | 第23页 |
·dax1 基因 | 第23-24页 |
·wnt4 基因 | 第24-27页 |
·wnt 基因及其家族 | 第25页 |
·wnt 信号通路 | 第25-26页 |
·wnt4 基因在性腺分化和性别决定中的作用 | 第26-27页 |
·鱼类中 wnt4 基因的研究进展 | 第27页 |
·ar 和 er 基因 | 第27-30页 |
·ar 和 er 的简介 | 第28页 |
·ar 和 er 在哺乳类等性腺分化和性别决定中的作用 | 第28-29页 |
·ar 和 er 在鱼类中的研究进展 | 第29-30页 |
·Lhx1 基因 | 第30-31页 |
·rspo1 基因 | 第31-33页 |
·rspo1 在性腺分化和性别决定中的作用 | 第32页 |
·鱼类中 rspo1 研究进展 | 第32-33页 |
·鲆鲽鱼类性别相关基因研究进展 | 第33-34页 |
·立题依据及意义 | 第34-36页 |
第二章 牙鲆 wnt4 基因克隆及表达分析 | 第36-66页 |
·材料与方法 | 第36-51页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·主要实验仪器 | 第37-38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·引物 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-51页 |
·牙鲆雌性各组织总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第39-43页 |
·RT-PCR 扩增基因 cDNA 保守片段 | 第43-46页 |
·RACE 扩增基因 | 第46-47页 |
·牙鲆 wnt4 基因 ORF 序列验证 | 第47-48页 |
·RT-PCR | 第48页 |
·Real-time RT-PCR | 第48-49页 |
·性腺石蜡切片 | 第49-50页 |
·数据分析 | 第50-51页 |
·结果 | 第51-62页 |
·牙鲆 wnt4 基因的序列及分析 | 第51-53页 |
·牙鲆 WNT4 蛋白的结构和理化性质初步分析 | 第53-55页 |
·牙鲆 WNT4 蛋白的同源性比较和分子系统进化分析 | 第55-57页 |
·wnt4 在牙鲆雌雄成鱼不同组织的表达差异 | 第57-59页 |
·wnt4 在牙鲆性腺不同发育时期的表达差异 | 第59-60页 |
·wnt4 在牙鲆幼鱼性腺分化期的表达差异 | 第60-62页 |
·雌核发育和高温性反转牙鲆的性别比例 | 第60-61页 |
·wnt4 在牙鲆幼鱼性腺分化期的定量表达 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-66页 |
第三章 牙鲆 ar 和 er 基因克隆、启动子区克隆及表达分析 | 第66-93页 |
·材料与方法 | 第66-72页 |
·实验材料、主要实验仪器和试剂 | 第66页 |
·引物 | 第66-67页 |
·实验方法 | 第67-72页 |
·牙鲆各组织总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第67-68页 |
·牙鲆性腺基因组 DNA 的提取 | 第68页 |
·RACE 扩增 ar 基因 | 第68页 |
·牙鲆 ar 基因 ORF 序列验证 | 第68-69页 |
·genome walking 扩增 erα 启动子区序列 | 第69-71页 |
·RT-PCR | 第71页 |
·real-time RT-PCR | 第71页 |
·数据分析 | 第71-72页 |
·结果 | 第72-90页 |
·牙鲆 ar 基因的序列及分析 | 第72-81页 |
·牙鲆 ar 基因的 cDNA 序列及分析 | 第72-75页 |
·牙鲆 ar 基因 cDNA 序列中 CpG 岛分析 | 第75-76页 |
·牙鲆 AR 蛋白的结构和性质推导 | 第76-78页 |
·牙鲆 AR 蛋白的同源性比较和分子系统进化分析 | 第78-81页 |
·牙鲆 er 基因的序列分析 | 第81-87页 |
·牙鲆 er cDNA 转录因子结合位点分析 | 第81-86页 |
·牙鲆 erα 基因上游启动子区序列及转录因子结合位点 CpG 岛预测 | 第86-87页 |
·ar& er 在牙鲆雌雄成鱼不同组织的表达差异 | 第87-90页 |
·讨论 | 第90-93页 |
第四章 牙鲆 Lhx1 克隆及表达分析 | 第93-111页 |
·材料和方法 | 第93-96页 |
·实验材料、主要实验仪器和试剂 | 第93页 |
·引物 | 第93-94页 |
·实验方法 | 第94-96页 |
·牙鲆各组织总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第94页 |
·牙鲆 Lhx1a 基因全长 cDNA 序列的扩增 | 第94-95页 |
·牙鲆 Lhx1a&Lhx1b 基因 ORF 序列验证 | 第95页 |
·RT-PCR | 第95-96页 |
·性腺石蜡切片 | 第96页 |
·数据分析 | 第96页 |
·结果 | 第96-108页 |
·牙鲆 Lhx1a 基因的序列及分析 | 第96-100页 |
·牙鲆 Lhx1a 全长 cDNA 的获得 | 第96-98页 |
·牙鲆 LHX1a 蛋白的结构和性质推导 | 第98-100页 |
·牙鲆 Lhx1b 基因的序列和分析 | 第100-104页 |
·牙鲆 Lhx1b 全长 cDNA | 第100-101页 |
·牙鲆 LHX1b 蛋白的结构和性质预测 | 第101-104页 |
·牙鲆 LHX1 蛋白的同源性比较和分子系统进化分析 | 第104-106页 |
·Lhx1a 和 Lhx1b 在牙鲆雌雄成鱼各组织的表达差异 | 第106-107页 |
·Lhx1a 和 Lhx1b 在牙鲆性腺发育各期的差异表达谱 | 第107-108页 |
·讨论 | 第108-111页 |
第五章 牙鲆 rspo1 克隆及表达分析 | 第111-120页 |
·材料与方法 | 第111-113页 |
·实验材料、主要实验仪器和试剂 | 第111页 |
·引物 | 第111-112页 |
·实验方法 | 第112-113页 |
·牙鲆性腺总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第112页 |
·牙鲆 rspo1 基因全长 cDNA 的获得 | 第112页 |
·牙鲆 rspo1 基因 ORF 序列验证 | 第112-113页 |
·RT-PCR 检测 rspo1 在牙鲆雌雄成鱼不同组织的差异表达 | 第113页 |
·数据分析 | 第113页 |
·结果 | 第113-119页 |
·牙鲆 rspo1 基因的序列及分析 | 第113-114页 |
·牙鲆 RSPO1 蛋白的结构和性质推导 | 第114-117页 |
·牙鲆 RSPO1 蛋白的同源性比较和分子系统进化分析 | 第117-118页 |
·rspo1 在牙鲆雌雄成鱼各组织的差异表达 | 第118-119页 |
·讨论 | 第119-120页 |
小结 | 第120-121页 |
附录 | 第121-124页 |
参考文献 | 第124-135页 |
作者简历 | 第135-136页 |
攻读硕士学位期间发表和完成的学术论文 | 第136页 |