| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 1. 绪论 | 第12-29页 |
| ·功能性蛋白相关基因 | 第12-26页 |
| ·脱水素 | 第12-15页 |
| ·热休克蛋白 | 第15页 |
| ·抗冻蛋白 | 第15-17页 |
| ·渗透保护剂 | 第17-21页 |
| ·抗氧化酶系统 | 第21-24页 |
| ·水孔蛋白 | 第24-25页 |
| ·离子转运蛋白 | 第25页 |
| ·脂肪酸去饱和酶 | 第25-26页 |
| ·调节性蛋白相关基因 | 第26-27页 |
| ·DREB/CBF转录因子 | 第26页 |
| ·NAC类转录因子 | 第26页 |
| ·WRKY类转录因子 | 第26-27页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第27页 |
| ·本研究的目的意义 | 第27-29页 |
| 2. 梅花胚胎发育晚期丰富蛋白基因家族生物信息分析 | 第29-41页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·实验方法(以梅花脱水素家族基因为例) | 第29-31页 |
| ·基因预测 | 第29页 |
| ·连锁群位置和基因结构 | 第29-30页 |
| ·序列比对和构建系统发育树 | 第30页 |
| ·蛋白模式预测与识别 | 第30页 |
| ·基因家族复制模式分析 | 第30-31页 |
| ·基因转换分析 | 第31页 |
| ·启动子分析 | 第31页 |
| ·蛋白理化性质预测 | 第31页 |
| ·结果分析 | 第31-39页 |
| ·梅花胚胎发育晚期丰富蛋白基因的预测 | 第31-33页 |
| ·梅花胚胎发育晚期丰富蛋白基因的分类 | 第33-36页 |
| ·梅花胚胎发育晚期丰富蛋白基因在连锁群上的位置和复制模式 | 第36-37页 |
| ·梅花胚胎发育晚期丰富蛋白基因的基因转换事件 | 第37-38页 |
| ·梅花胚胎发育晚期丰富蛋白基因的启动子分析 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 3. 梅花脱水素家族基因的克隆与表达分析 | 第41-59页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·实验材料与方法 | 第41-46页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·RNA提取 | 第42页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第42-43页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第43-44页 |
| ·琼脂糖凝胶回收DNA | 第44页 |
| ·质粒提取 | 第44-45页 |
| ·载体酶切加T | 第45页 |
| ·电转化用大肠杆菌感受态制备 | 第45页 |
| ·连接转化大肠杆菌 | 第45-46页 |
| ·实时定量PCR | 第46页 |
| ·结果分析 | 第46-57页 |
| ·梅花脱水素家族基因的克隆 | 第46-56页 |
| ·梅花脱水素家族基因在不同器官中的表达水平 | 第56页 |
| ·梅花脱水素家族基因在逆境处理下的表达水平 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 4. 梅花脱水素基因的原核表达及其对大肠杆菌抗逆能力的影响 | 第59-67页 |
| ·引言 | 第59页 |
| ·实验材料与方法 | 第59-61页 |
| ·实验材料 | 第59页 |
| ·原核表达载体构建 | 第59页 |
| ·原核表达 | 第59-60页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第60页 |
| ·大肠杆菌抗性检测 | 第60-61页 |
| ·结果分析 | 第61-65页 |
| ·梅花脱水素基因原核表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·梅花脱水素基因的原核表达 | 第62-63页 |
| ·梅花脱水素基因原核表达对大肠杆菌抗逆性的影响 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 5. 梅花脱水素家族基因的转基因研究 | 第67-76页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·实验材料与方法 | 第67-69页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第67页 |
| ·电击法农杆菌感受态的制备 | 第67页 |
| ·电击法转化农杆菌感受态 | 第67页 |
| ·叶圆盘法烟草转基因 | 第67-68页 |
| ·转基因植株PCR验证 | 第68-69页 |
| ·梅花脱水素基因表达水平检测 | 第69页 |
| ·烟草种子发芽实验 | 第69页 |
| ·转基因烟草电导率测定 | 第69页 |
| ·结果分析 | 第69-74页 |
| ·梅花脱水素家族基因真核表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·梅花脱水素家族基因转基因烟草的获得 | 第70-73页 |
| ·超表达梅花脱水素家族基因对烟草抗冻性的影响 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 6. 结论与展望 | 第76-78页 |
| ·结论 | 第76页 |
| ·创新点 | 第76页 |
| ·展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-98页 |
| 个人简介 | 第98-100页 |
| 导师简介 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
