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茶树被茶尺蠖取食诱导的一个13-脂氧合酶基因的分离、功能鉴定与表达分析

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 文献综述第10-19页
   ·植物脂氧合酶的基本特征第10-13页
     ·脂氧合酶的生化特征第10页
     ·脂氧合酶的分布第10-11页
     ·脂氧合酶的家族分类第11-13页
   ·植物脂氧合酶在植物器官发育中的作用第13页
   ·植物脂氧合酶在非生物胁迫诱导中的作用第13页
   ·植物脂氧合酶在生物逆境诱导防御中的作用第13-19页
     ·脂氧合酶在病害诱导防御中的研究进展第13-14页
     ·脂氧合酶在病害诱导防御中的作用机理第14页
     ·脂氧合酶在虫害诱导防御中的研究进展第14-15页
     ·脂氧合酶在虫害诱导防御中的作用机理第15-19页
2 引言第19-22页
   ·研究意义及目的第19-20页
   ·研究内容第20-21页
     ·利用 RACE 克隆 CsLOX3 的 cDNA 全长第20页
     ·LOXs 氨基酸序列分析及进化树构建第20页
     ·CsLOX3 原核表达及产物鉴定第20页
     ·茶树叶片 CsLOX3 表达的 qRT-PCR 分析第20-21页
   ·技术路线第21-22页
3 材料与方法第22-37页
   ·实验材料第22页
     ·茶树品种第22页
     ·茶尺蠖及试验处理第22页
   ·仪器与试剂第22-23页
     ·主要实验仪器第22-23页
     ·主要试剂第23页
   ·实验方法第23-37页
     ·茶树叶片总 RNA 的提取及质量检测第23-25页
     ·CsLOX3 的 cDNA 全长克隆第25-30页
     ·CsLOX3 cDNA 全长序列的生物信息学分析第30页
     ·CsLOX3 原核载体构建与转化第30-32页
     ·CsLOX3 原核蛋白表达第32-33页
     ·CsLOX3 原核蛋白表达条件的优化第33页
     ·CsLOX3 原核表达蛋白的纯化第33-34页
     ·CsLOX3 原核表达蛋白的酶活测定及产物鉴定第34页
     ·CsLOX3 表达的 qRT-PCR 分析第34-37页
4 结果与分析第37-56页
   ·茶树叶片总 RNA 的提取与检测第37-38页
     ·总 RNA 的提取第37页
     ·提取 RNA 的纯度检测第37-38页
     ·cDNA 第一链的电泳检测及浓度测定第38页
   ·CSLOX3 的 CDNA全长克隆与序列分析第38-40页
     ·CsLOX3 基因的 3′/5′-RACE 克隆第38-39页
     ·CsLOX3 的全长克隆第39-40页
   ·CSLOXS 的序列分析第40-44页
     ·保守区域预测与分析第40-41页
     ·LOXs 进化树分析第41-43页
     ·氨基酸序列特征的比对与分析第43-44页
   ·CSLOX3 原核表达第44-50页
     ·CsLOX3 表达载体的构建第44-46页
     ·CsLOX3 的原核表达优化第46-48页
     ·CsLOX3 原核表达蛋白的纯化第48页
     ·CsLOX3 原核表达蛋白的酶活力测定第48-49页
     ·CsLOX3 原核蛋白催化反应的产物鉴定第49-50页
   ·茶树中 CSLOX3基因的表达特征分析第50-56页
     ·不同发育阶段的表达特征第51-52页
     ·茶尺蠖取食诱导的表达特征第52-53页
     ·机械损失诱导的表达特征第53-54页
     ·MeJA 和 SA 诱导表达特征第54-56页
5 讨论第56-59页
   ·LOXS 氨基酸序列特征的比较分析第56页
   ·原核表达与酶活产物确定第56-57页
   ·实时荧光定量 PCR 技术第57页
   ·CSLOX3 在茶树中的功能探讨第57-59页
6 结论第59-60页
参考文献第60-66页
附录 A 中英文缩写与注释第66-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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