| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-31页 |
| ·稻瘟病菌概况 | 第14-23页 |
| ·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第14-15页 |
| ·稻瘟病菌侵染循环 | 第15-17页 |
| ·稻瘟病菌致病相关途径 | 第17-23页 |
| ·V-ATPASE | 第23-27页 |
| ·V-ATPase结构 | 第23-25页 |
| ·V-ATPase组装过程 | 第25页 |
| ·V-ATPase功能研究 | 第25-26页 |
| ·V-ATPase活性调控 | 第26-27页 |
| ·SNARE | 第27-30页 |
| ·SNARE结构与分类 | 第27-28页 |
| ·真菌SNARE研究进展 | 第28-30页 |
| ·本研究目的及内容 | 第30-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-46页 |
| ·试验菌株及培养条件 | 第31-32页 |
| ·稻瘟病菌菌株及培养条件 | 第31页 |
| ·细菌菌株及培养条件 | 第31页 |
| ·培养基配方 | 第31-32页 |
| ·载体的构建 | 第32-34页 |
| ·聚合酶链反应(PCR) | 第32-33页 |
| ·DNA 操作 | 第33页 |
| ·质粒大肠杆菌转化 | 第33页 |
| ·敲除载体构建方法(Double-joint PCR) | 第33-34页 |
| ·稻瘟病菌T-DNA转化 | 第34-36页 |
| ·载体农杆菌转化(冻融法) | 第34-35页 |
| ·稻瘟病菌ATMT | 第35-36页 |
| ·稻瘟病菌DNA及RNA的提取 | 第36-38页 |
| ·基因组DNA大量提取(CTAB法) | 第36-37页 |
| ·基因组DNA小量提取 | 第37页 |
| ·稻瘟病菌RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交 | 第38-41页 |
| ·Southern杂交DNA DIG标记 | 第38页 |
| ·基因组DNA酶切、电泳及变性 | 第38-39页 |
| ·DNA转膜 | 第39页 |
| ·Southern杂交过程 | 第39-40页 |
| ·免疫显色 | 第40-41页 |
| ·突变体表型分析 | 第41-43页 |
| ·不同条件下的生长速度检测 | 第41页 |
| ·原生质体释放试验 | 第41-42页 |
| ·产孢量分析 | 第42页 |
| ·分生孢子梗形态观察 | 第42页 |
| ·分生孢子及附着胞分析 | 第42-43页 |
| ·稻瘟病菌致病性分析 | 第43-44页 |
| ·大麦叶片离体接种 | 第43页 |
| ·水稻叶片离体接种 | 第43页 |
| ·水稻喷雾接种 | 第43-44页 |
| ·稻瘟病菌植物细胞侵染观察 | 第44页 |
| ·大麦叶片侵染显微观察 | 第44页 |
| ·洋葱表皮细胞穿透 | 第44页 |
| ·稻瘟病菌细胞结构观察 | 第44-46页 |
| 第三章 稻瘟病菌V-ATPase c’亚基的功能分析 | 第46-65页 |
| ·结果分析 | 第46-61页 |
| ·稻瘟病菌V-ATPase亚基鉴定及部分亚基表达分析 | 第46-47页 |
| ·稻瘟病菌VMA11同源基因的分析和敲除 | 第47-49页 |
| ·MoVMA11的缺失极大削弱了稻瘟病菌菌丝生长和产孢 | 第49-52页 |
| ·AMovma11突变体有着和酿酒酵母类似的Vma-表型 | 第52-54页 |
| ·MoVMA11的缺失影响了附着胞的形成和细胞壁的完整性 | 第54-56页 |
| ·MoVMA11是稻瘟病菌致病性所必需的 | 第56-58页 |
| ·稻瘟病菌中Movma11及其它两个V-ATPase亚基的亚细胞定位 | 第58-61页 |
| ·MoVMA11是液泡酸化所必需的 | 第61页 |
| ·本章讨论 | 第61-65页 |
| 第四章 六个稻瘟病菌SNARE同源基因的功能分析 | 第65-86页 |
| ·实验结果 | 第65-82页 |
| ·SNARE基因分析及六个基因敲除突变体的获得 | 第65-68页 |
| ·MoSNC等四个SNARE基因参与稻瘟病菌的产孢过程 | 第68-69页 |
| ·MoSNC等四个SNARE基因在附着胞构建过程中起功能 | 第69-72页 |
| ·基因缺失对于稻瘟病菌细胞壁完整性的影响 | 第72-74页 |
| ·高渗能互补△Mosyn8突变体的生长 | 第74-76页 |
| ·MoNYV1等五个基因和稻瘟病菌致病能力相关性不大 | 第76-78页 |
| ·MoSYN8与稻瘟病菌致病性密切相关 | 第78-82页 |
| ·MoSNC等四个SNARE基因的qRT-PCR分析 | 第82页 |
| ·本章讨论 | 第82-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 附表1 | 第100-103页 |
| 附表2 | 第103页 |
