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水稻多逆境响应基因OsMsr16的干扰表达研究

目录第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-27页
   ·植物抗逆境机制研究意义第10-12页
   ·锌指蛋白第12-14页
   ·植物抗逆境分子机制第14-20页
   ·研究植物基因功能的主要方法第20-25页
   ·本研究的选题依据及意义第25-27页
第二章 材料与方法第27-49页
   ·材料第27-31页
     ·植物材料第27页
     ·菌株第27页
     ·质粒载体第27页
     ·培养基第27-30页
       ·细菌培养所需培养基第27-28页
       ·水稻成熟胚组织培养所需培养基第28-30页
     ·常用生化试剂、酶以及反应试剂盒第30页
     ·引物合成及测序第30-31页
     ·主要仪器第31页
   ·试验方法第31-49页
     ·抗逆基因OsMsr16的获得第31-32页
       ·基因芯片分析第31-32页
     ·OsMsr16基因的生物信息学分析第32-33页
     ·OsMsr16基因保守片度的获得第33-36页
       ·OsMsr16基因保守片度的PCR扩增第33页
       ·OsMsr16基因保守片段PCR凝胶电泳片段的分离及回收第33-34页
       ·OsMsr16基因保守片段与克隆载体的连接反应第34页
       ·CaCl2法制备大肠杆菌DH5α或DH10B感受态细胞第34-35页
       ·克隆载体转化大肠杆菌感受态细胞第35页
       ·阳性克隆的筛选及鉴定第35-36页
     ·干扰载体构建第36-41页
     ·干扰表达载体转化农杆菌EHA105感受态细胞第41-42页
       ·CaCl2法制备农杆菌EHA105感受态细胞第41页
       ·干扰载体转化农杆菌EHA105第41页
       ·农杆菌阳性克隆鉴定第41-42页
     ·pRNAi-JIT-OsMsrl6干扰载体遗传转化水稻第42-43页
     ·转基因植株的阳性鉴定第43-46页
       ·PCR法筛选转基因植株第43-44页
       ·Southern杂交检测转基因阳性植株第44-46页
     ·干扰植株的目的基因表达量分析第46-48页
     ·干扰植株表型鉴定第48-49页
       ·干扰植株生长势观测第48页
       ·花粉碘染实验第48页
       ·柱头低倍显微镜观察第48页
       ·转基因植株结实率统计第48-49页
第三章 结果与分析第49-61页
   ·OsMsr16基因的获得与生物信息学分析第49-53页
     ·OsMsr16在逆境下的表达水平分析第49-50页
     ·OsMsr16基因及其启动子结构的分析第50-51页
     ·OsMsr16蛋白质序列分析第51-53页
   ·OsMsr16干扰表达载体的构建第53-55页
   ·OsMsr16干扰载体的遗传转化第55页
   ·转基因植株的阳性鉴定第55-58页
     ·转基因植株的PCR筛选第55-57页
     ·转基因植株的Southern筛选第57-58页
   ·转基因植株的表达量检测第58-59页
   ·OsMsr16干扰植株的表型特征第59-61页
第四章 讨论与结论第61-64页
第五章 参考文献第64-70页
致谢第70页

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