目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-27页 |
·植物抗逆境机制研究意义 | 第10-12页 |
·锌指蛋白 | 第12-14页 |
·植物抗逆境分子机制 | 第14-20页 |
·研究植物基因功能的主要方法 | 第20-25页 |
·本研究的选题依据及意义 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-49页 |
·材料 | 第27-31页 |
·植物材料 | 第27页 |
·菌株 | 第27页 |
·质粒载体 | 第27页 |
·培养基 | 第27-30页 |
·细菌培养所需培养基 | 第27-28页 |
·水稻成熟胚组织培养所需培养基 | 第28-30页 |
·常用生化试剂、酶以及反应试剂盒 | 第30页 |
·引物合成及测序 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-49页 |
·抗逆基因OsMsr16的获得 | 第31-32页 |
·基因芯片分析 | 第31-32页 |
·OsMsr16基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
·OsMsr16基因保守片度的获得 | 第33-36页 |
·OsMsr16基因保守片度的PCR扩增 | 第33页 |
·OsMsr16基因保守片段PCR凝胶电泳片段的分离及回收 | 第33-34页 |
·OsMsr16基因保守片段与克隆载体的连接反应 | 第34页 |
·CaCl2法制备大肠杆菌DH5α或DH10B感受态细胞 | 第34-35页 |
·克隆载体转化大肠杆菌感受态细胞 | 第35页 |
·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第35-36页 |
·干扰载体构建 | 第36-41页 |
·干扰表达载体转化农杆菌EHA105感受态细胞 | 第41-42页 |
·CaCl2法制备农杆菌EHA105感受态细胞 | 第41页 |
·干扰载体转化农杆菌EHA105 | 第41页 |
·农杆菌阳性克隆鉴定 | 第41-42页 |
·pRNAi-JIT-OsMsrl6干扰载体遗传转化水稻 | 第42-43页 |
·转基因植株的阳性鉴定 | 第43-46页 |
·PCR法筛选转基因植株 | 第43-44页 |
·Southern杂交检测转基因阳性植株 | 第44-46页 |
·干扰植株的目的基因表达量分析 | 第46-48页 |
·干扰植株表型鉴定 | 第48-49页 |
·干扰植株生长势观测 | 第48页 |
·花粉碘染实验 | 第48页 |
·柱头低倍显微镜观察 | 第48页 |
·转基因植株结实率统计 | 第48-49页 |
第三章 结果与分析 | 第49-61页 |
·OsMsr16基因的获得与生物信息学分析 | 第49-53页 |
·OsMsr16在逆境下的表达水平分析 | 第49-50页 |
·OsMsr16基因及其启动子结构的分析 | 第50-51页 |
·OsMsr16蛋白质序列分析 | 第51-53页 |
·OsMsr16干扰表达载体的构建 | 第53-55页 |
·OsMsr16干扰载体的遗传转化 | 第55页 |
·转基因植株的阳性鉴定 | 第55-58页 |
·转基因植株的PCR筛选 | 第55-57页 |
·转基因植株的Southern筛选 | 第57-58页 |
·转基因植株的表达量检测 | 第58-59页 |
·OsMsr16干扰植株的表型特征 | 第59-61页 |
第四章 讨论与结论 | 第61-64页 |
第五章 参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |