缩略词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 水稻光敏感核不育基因pms3的克隆与功能分析 | 第11-96页 |
1. 文献综述 | 第11-29页 |
·植物雄性不育研究进展 | 第11-20页 |
·Long non-coding RNA的研究进展 | 第20-26页 |
·植物DNA甲基化的研究进展 | 第26-28页 |
·本研究的背景、目的与意义 | 第28-29页 |
2. 材料方法 | 第29-39页 |
·水稻材料与田间种植 | 第29页 |
·遗传转化载体的构建与转化 | 第29-33页 |
·转基因植株的DNA抽提,阳性检测与Southern blot拷贝数分析 | 第33-34页 |
·育性考察方法 | 第34页 |
·基因表达分析 | 第34-37页 |
·DNA甲基化修饰的分析 | 第37页 |
·细胞学观察与花药发育的PCD检测 | 第37-38页 |
·Small RNA分析 | 第38-39页 |
3. 结果分析 | 第39-86页 |
·pms3的定位 | 第39-43页 |
·遗传转化实验确定候选基因位于定位区间 | 第43-48页 |
·定位区间候选基因的确定 | 第48-51页 |
·候选基因的表达分析 | 第51-56页 |
·定位区间候选基因的遗传转化与功能分析 | 第56-78页 |
·pms3调控花粉发育的分子路径研究 | 第78-86页 |
4. 讨论 | 第86-96页 |
·控制光敏感核不育的分子作用模型探讨 | 第86页 |
·关于pms3深入研究的设想 | 第86-94页 |
·长链非编码RNA的的生物学功能 | 第94页 |
·水稻光敏感雄性不育研究的理论意义与应用前景 | 第94-96页 |
第二章 水稻广亲和基因S5功能分析及作用机理研究 | 第96-126页 |
5. 文献综述 | 第96-107页 |
·水稻籼粳杂种不育机理的研究 | 第96-101页 |
·植物天冬氨酸蛋白酶研究进展 | 第101-102页 |
·蛋白质功能研究方法与技术 | 第102-106页 |
·本研究的背景、目的与意义 | 第106-107页 |
6. 材料与方法 | 第107-112页 |
·转化载体及菌株 | 第107页 |
·载体构建及转化 | 第107-108页 |
·体外表达目标蛋白与天冬氨酸蛋白酶活性测定 | 第108-109页 |
·S5抗体的制备与特异性检测 | 第109-110页 |
·SDS-PAGE电泳及Western blot | 第110页 |
·天冬氨酸蛋白酶自我剪接分析 | 第110页 |
·体内蛋白检测情况 | 第110-111页 |
·双向电泳(2D SDS-PAGE)寻找S5的底物 | 第111-112页 |
7. 实验结果 | 第112-123页 |
·S5蛋白结构分析与同源比对分析 | 第112-114页 |
·S5i ORF的获得 | 第114-115页 |
·S5的原核表达与纯化 | 第115-116页 |
·S5抗体的制备与特异性检测 | 第116-117页 |
·S5体外酶活性检测与自身剪接形成成熟蛋白的初步分析 | 第117页 |
·籼、粳S5及缺失差异氨基酸后S5蛋白酶活性的定性比较分析 | 第117-118页 |
·酵母双杂交验证S5是否形成二聚体 | 第118-119页 |
·体内蛋白检测情况 | 第119-120页 |
·蛋白质组学方法寻找S5的底物 | 第120-123页 |
8. 讨论 | 第123-126页 |
·S5蛋白酶活性的检测 | 第123页 |
·籼-粳S5相互作用的机理研究 | 第123-124页 |
·S5作用底物的寻找 | 第124页 |
·双向电泳中总蛋白抽提方法的优化 | 第124-126页 |
参考文献 | 第126-143页 |
致谢 | 第143-144页 |
附录 | 第144-164页 |
附录Ⅰ:本研究中所用引物 | 第144-151页 |
附录Ⅱ:部分试验的详细步骤 | 第151-163页 |
附录Ⅲ:作者简介 | 第163-164页 |