摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 中国大鲵的研究进展 | 第11-14页 |
·中国大鲵的遗传学方面研究 | 第11-12页 |
·中国大鲵的生理生化方面研究 | 第12-13页 |
·中国大鲵的繁殖研究 | 第13-14页 |
2 促黄体生成素(LH)的研究进展 | 第14-19页 |
·LH的结构 | 第14-16页 |
·LH的生理作用 | 第16-17页 |
·LH在动物繁殖上的研究进展 | 第17-19页 |
3 促黄体生成素受体(LHR)的研究进展 | 第19-20页 |
·LHR的结构 | 第19页 |
·LHR在组织表达方面的研究 | 第19-20页 |
4 选题的目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 大鲵LHβ、LHR基因中间保守片段的克隆 | 第21-29页 |
1 材料与方法 | 第21-25页 |
·材料 | 第21-22页 |
·动物材料 | 第21页 |
·菌种和载体 | 第21页 |
·实验试剂 | 第21页 |
·主要溶液和培养基 | 第21-22页 |
·实验仪器 | 第22页 |
·方法 | 第22-25页 |
·引物设计 | 第22页 |
·样品采集及处理 | 第22页 |
·大鲵脑RNA提取 | 第22-23页 |
·cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
·大鲵LHβ基因保守片段的PCR | 第24页 |
·大鲵LHR基因保守片段的PCR | 第24页 |
·扩增产物的T载体克隆及测序 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-28页 |
·大鲵脑RNA的提取 | 第25页 |
·大鲵LHβ和LHR基因的中间保守片段PCR | 第25-26页 |
·序列结果及分析 | 第26-28页 |
·大鲵LHβ基因中间保守片段测序结果 | 第26页 |
·大鲵LHR基因中间保守片段测序结果 | 第26-27页 |
·大鲵LHβ基因测序结果分析 | 第27页 |
·大鲵LHR基因测序结果分析 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-29页 |
第三章 大鲵LHβ、LHR基因cDNA的克隆及序列分析 | 第29-50页 |
1 材料与方法 | 第29-34页 |
·材料 | 第29页 |
·方法 | 第29-34页 |
·引物设计 | 第29-30页 |
·RNA的提取 | 第30页 |
·cDNA3’末端快速扩增(3’RACE) | 第30-32页 |
·cDNA5’端快速扩增(5’RACE) | 第32-34页 |
·扩增产物的T载体克隆及测序 | 第34页 |
2 结果及分析 | 第34-41页 |
·大鲵LHβ基因3’RACE和5’RACE | 第34-35页 |
·大鲵LHR基因3’RACE和5’RACE | 第35-36页 |
·测序结果拼接 | 第36页 |
·大鲵LHβ基因序列分析 | 第36-38页 |
·核苷酸序列分析 | 第36-37页 |
·氨基酸序列分析 | 第37-38页 |
·大鲵LHR基因序列分析 | 第38-41页 |
·核苷酸序列分析 | 第40页 |
·氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·关于LHβ | 第41-42页 |
·关于LHR | 第42页 |
·关于RACE法 | 第42-44页 |
附图 | 第44-50页 |
第四章 大鲵LHβ基因、LHR基因在不同组织中的表达分析 | 第50-61页 |
1 材料与方法 | 第50-54页 |
·材料 | 第50页 |
·动物材料 | 第50页 |
·实验试剂 | 第50页 |
·实验仪器 | 第50页 |
·方法 | 第50-54页 |
·引物设计 | 第50-51页 |
·RNA提取 | 第51页 |
·纯化RNA | 第51页 |
·cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
·LHβ、LHR基因半定量RT-PCR不同组织表达分析 | 第52-54页 |
2 结果与分析 | 第54-59页 |
·RNA质量检测 | 第54-55页 |
·同管扩增或异管扩增的选择 | 第55-56页 |
·LHp、LHR基因最适温度的确定 | 第56-57页 |
·LHp、LHR及β-actin基因最适循环数的确定 | 第57-58页 |
·不同组织中LHβ、LHR基因表达分析 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
·RT-PCR半定量技术 | 第59页 |
·中国大鲵不同组织中LHβ、LHR基因的表达分析 | 第59-61页 |
结论与创新点 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |