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鼠疫耶尔森氏菌小RNA RyhB1和RyhB2调控和生理比较研究

摘要第1-9页
英文摘要第9-19页
前言第19-37页
第一章 RyhB_1和RyhB_2突变株及过表达株的构建第37-60页
   ·引言第37-39页
   ·实验材料第39-42页
   ·实验方法第42-54页
     ·△RyhB_1突变株构建第42-46页
     ·△RyhB_2突变株构建第46-48页
     ·△RyhB_1:△RyhB_2双敲除的构建第48-50页
     ·△ryhB_1:△ryhB_2:△fur突变株构建第50-52页
     ·pBAD-RyhB_1和pBAD-RyhB_2过表达株的构建第52-54页
   ·结果第54-58页
     ·△ryhB_1缺失株的构建第54-55页
     ·△ryhB_2缺失株的构建第55页
     ·△ryhB_1:ryhB_2双缺失株构建第55-56页
     ·Z\/7/z5/.-Z\/7/252/4/wr缺失株及pKD46 质粒消除鉴定第56-57页
     ·RyhB-pBAD重组质粒鉴定及测序第57-58页
     ·RyhBi和RyhB2过表达株的构建第58页
   ·讨论第58-60页
第二章 RyhB_1和RyhB_2自调控研究第60-96页
   ·引言第60页
   ·实验材料第60-71页
   ·实验方法第71-82页
     ·RyhB_1和RyhB_2生物信息学预测第71页
     ·Trizol提取总RNA第71-73页
     ·引物延伸试验第73-76页
     ·体外转录制备5sRNA探针第76-77页
     ·Northern blot试验第77-81页
     ·统计学分析第81-82页
   ·结果第82-92页
     ·sRNA RyhB_1和RyhB_2鉴定第82-85页
     ·Fur、铁和Hfq对RyhB_1和RyhB_2的调控第85-91页
     ·Hfq对RyhB_1和RyhB_2稳定性的影响第91-92页
   ·讨论第92-96页
第三章 RyhB_1和RyhB_2调控元研究第96-124页
   ·引言第96-98页
   ·实验材料第98-99页
   ·实验方法第99-108页
     ·PureLink~(TM) RNA Mini Kit提取总RNA第99-101页
     ·Northern blot试验第101页
     ·生物芯片第101-105页
     ·肽质量指纹谱技术第105-108页
   ·结果第108-124页
     ·RyhB_1和RyhB_2过表达株成功构建第108-109页
     ·RyhB_1和RyhB_2调控mRNA转录谱第109-117页
       ·RyhB_1和RyhB_2调控靶mRNA第109-110页
       ·RyhBi和RyhB2调控的mRNA功能分类第110-117页
     ·RyhB_1和RyhB_2调控差异蛋白谱第117-121页
       ·二维凝胶电泳的重复性分析第117页
       ·RyhB_1调控的差异蛋白质斑点第117-118页
       ·RyhB_2调控的差异蛋白质斑点第118-120页
       ·RyhB_1和RyhB_2调控的蛋白质功能分类第120-121页
   ·讨论第121-124页
第四章 RyhB_1和RyhB_2表型和毒力研究第124-140页
   ·引言第124-125页
   ·实验材料第125-126页
   ·实验方法第126-130页
     ·Northern blot检测RyhB在脏器中表达第126页
     ·表型试验第126-129页
       ·RyhB对鼠疫菌生长的影响第126页
       ·RyhB对鼠疫菌低铁环境生长的影响第126-127页
       ·RyhB对鼠疫菌高盐环境耐受的影响第127页
       ·RyhB对鼠疫菌H_2O_2抗性的影响第127页
       ·生物膜试验第127-129页
     ·毒力试验第129-130页
       ·野生株和RyhB突变株竞争实验第129页
       ·小鼠生存试验第129-130页
     ·统计学分析第130页
   ·结果第130-137页
     ·RyhB在感染脏器中差异表达第130-131页
     ·表型试验结果第131-135页
     ·毒力试验第135-137页
   ·讨论第137-140页
参考文献第140-144页
全文小结第144-146页
主要成果第146-147页
致谢第147-149页

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