摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-19页 |
前言 | 第19-37页 |
第一章 RyhB_1和RyhB_2突变株及过表达株的构建 | 第37-60页 |
·引言 | 第37-39页 |
·实验材料 | 第39-42页 |
·实验方法 | 第42-54页 |
·△RyhB_1突变株构建 | 第42-46页 |
·△RyhB_2突变株构建 | 第46-48页 |
·△RyhB_1:△RyhB_2双敲除的构建 | 第48-50页 |
·△ryhB_1:△ryhB_2:△fur突变株构建 | 第50-52页 |
·pBAD-RyhB_1和pBAD-RyhB_2过表达株的构建 | 第52-54页 |
·结果 | 第54-58页 |
·△ryhB_1缺失株的构建 | 第54-55页 |
·△ryhB_2缺失株的构建 | 第55页 |
·△ryhB_1:ryhB_2双缺失株构建 | 第55-56页 |
·Z\/7/z5/.-Z\/7/252/4/wr缺失株及pKD46 质粒消除鉴定 | 第56-57页 |
·RyhB-pBAD重组质粒鉴定及测序 | 第57-58页 |
·RyhBi和RyhB2过表达株的构建 | 第58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第二章 RyhB_1和RyhB_2自调控研究 | 第60-96页 |
·引言 | 第60页 |
·实验材料 | 第60-71页 |
·实验方法 | 第71-82页 |
·RyhB_1和RyhB_2生物信息学预测 | 第71页 |
·Trizol提取总RNA | 第71-73页 |
·引物延伸试验 | 第73-76页 |
·体外转录制备5sRNA探针 | 第76-77页 |
·Northern blot试验 | 第77-81页 |
·统计学分析 | 第81-82页 |
·结果 | 第82-92页 |
·sRNA RyhB_1和RyhB_2鉴定 | 第82-85页 |
·Fur、铁和Hfq对RyhB_1和RyhB_2的调控 | 第85-91页 |
·Hfq对RyhB_1和RyhB_2稳定性的影响 | 第91-92页 |
·讨论 | 第92-96页 |
第三章 RyhB_1和RyhB_2调控元研究 | 第96-124页 |
·引言 | 第96-98页 |
·实验材料 | 第98-99页 |
·实验方法 | 第99-108页 |
·PureLink~(TM) RNA Mini Kit提取总RNA | 第99-101页 |
·Northern blot试验 | 第101页 |
·生物芯片 | 第101-105页 |
·肽质量指纹谱技术 | 第105-108页 |
·结果 | 第108-124页 |
·RyhB_1和RyhB_2过表达株成功构建 | 第108-109页 |
·RyhB_1和RyhB_2调控mRNA转录谱 | 第109-117页 |
·RyhB_1和RyhB_2调控靶mRNA | 第109-110页 |
·RyhBi和RyhB2调控的mRNA功能分类 | 第110-117页 |
·RyhB_1和RyhB_2调控差异蛋白谱 | 第117-121页 |
·二维凝胶电泳的重复性分析 | 第117页 |
·RyhB_1调控的差异蛋白质斑点 | 第117-118页 |
·RyhB_2调控的差异蛋白质斑点 | 第118-120页 |
·RyhB_1和RyhB_2调控的蛋白质功能分类 | 第120-121页 |
·讨论 | 第121-124页 |
第四章 RyhB_1和RyhB_2表型和毒力研究 | 第124-140页 |
·引言 | 第124-125页 |
·实验材料 | 第125-126页 |
·实验方法 | 第126-130页 |
·Northern blot检测RyhB在脏器中表达 | 第126页 |
·表型试验 | 第126-129页 |
·RyhB对鼠疫菌生长的影响 | 第126页 |
·RyhB对鼠疫菌低铁环境生长的影响 | 第126-127页 |
·RyhB对鼠疫菌高盐环境耐受的影响 | 第127页 |
·RyhB对鼠疫菌H_2O_2抗性的影响 | 第127页 |
·生物膜试验 | 第127-129页 |
·毒力试验 | 第129-130页 |
·野生株和RyhB突变株竞争实验 | 第129页 |
·小鼠生存试验 | 第129-130页 |
·统计学分析 | 第130页 |
·结果 | 第130-137页 |
·RyhB在感染脏器中差异表达 | 第130-131页 |
·表型试验结果 | 第131-135页 |
·毒力试验 | 第135-137页 |
·讨论 | 第137-140页 |
参考文献 | 第140-144页 |
全文小结 | 第144-146页 |
主要成果 | 第146-147页 |
致谢 | 第147-149页 |