拟南芥DSP4淀粉结合域的结构特征和定点突变研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| 1 蛋白质三维结构研究进展 | 第10-15页 |
| ·蛋白质三维结构的实验测定方法 | 第10-11页 |
| ·蛋白质三维结构预测的理论基础及方法 | 第11-12页 |
| ·MODELLER同源建模 | 第12-14页 |
| ·SBD三维结构研究进展 | 第14-15页 |
| 2 植物淀粉代谢调控研究进展 | 第15-19页 |
| ·植物淀粉的组成及形态结构 | 第15页 |
| ·植物淀粉的合成 | 第15-16页 |
| ·植物淀粉的降解 | 第16-17页 |
| ·DSP4与淀粉代谢的联系及其研究进展 | 第17-19页 |
| 3 Ca~(2+)在植物体中的生理功能 | 第19-20页 |
| 4 本课题的研究内容与意义 | 第20-21页 |
| ·前期研究工作简述及有待解决的问题 | 第20-21页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| 参考文献 | 第21-28页 |
| 第二章 拟南芥DSP4淀粉结合域的结构预测及分析 | 第28-45页 |
| 1 引言 | 第28页 |
| 2 数据库及软件 | 第28页 |
| 3 实验方法 | 第28-31页 |
| ·获取DSP4的基因序列及亚细胞定位分析 | 第28-29页 |
| ·DSP4结构域及进化分析 | 第29-30页 |
| ·DSP4SBD保守氨基酸残基位点预测 | 第30页 |
| ·DSP4DSP和SBD的3D结构预测及评估 | 第30页 |
| ·Ca~(2+)结合位点预测 | 第30-31页 |
| 4 实验结果与分析 | 第31-41页 |
| ·DSP4序列信息和亚细胞定位结果 | 第31页 |
| ·DSP4结构域分析 | 第31-32页 |
| ·DSP4进化分析 | 第32-34页 |
| ·DSP4SBD关键氨基酸残基位点预测 | 第34-36页 |
| ·DSP4DSP和SBD的3D结构预测 | 第36-39页 |
| ·Ca~(2+)结合位点预测 | 第39-41页 |
| 5 本章讨论与小结 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三章 拟南芥DSP4淀粉结合域的定点突变研究 | 第45-72页 |
| 1 引言 | 第45页 |
| 2 材料和仪器 | 第45-51页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器和设备 | 第46页 |
| ·主要溶液的配制 | 第46-49页 |
| ·基因克隆和表达技术原理及克隆载体 | 第49-51页 |
| 3 实验方法 | 第51-64页 |
| ·In vitro DSP4 SBD功能研究 | 第51-62页 |
| ·In vivo DSP4 SBD功能研究 | 第62-64页 |
| 4 实验结果与分析 | 第64-69页 |
| ·RNA电泳结果和pCR8-DSP4质粒的构建 | 第64页 |
| ·In vivo DSP4蛋白诱导及纯化结果 | 第64-65页 |
| ·突变型DSP4与淀粉的结合能力 | 第65-66页 |
| ·Ca~(2+)对DSP4功能的影响 | 第66-67页 |
| ·荧光显微镜结果 | 第67-68页 |
| ·SEM结果 | 第68-69页 |
| 5 本章讨论与小结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |