| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1. 前言 | 第9-16页 |
| ·Ⅱa 类细菌素 | 第9-12页 |
| ·Ⅱa 类细菌素简介 | 第9-10页 |
| ·Ⅱa 类细菌素重组表达的研究进展 | 第10-11页 |
| ·Ⅱa 类细菌素在食品中的应用 | 第11-12页 |
| ·无细胞蛋白质合成系统 | 第12-13页 |
| ·无细胞蛋白质合成系统的简介 | 第12页 |
| ·无细胞蛋白质合成系统的机理和优势 | 第12-13页 |
| ·无细胞蛋白质合成系统的应用和进展 | 第13页 |
| ·课题研究意义和内容 | 第13-16页 |
| ·本课题研究意义 | 第13-14页 |
| ·主要研究内容 | 第14-16页 |
| 2. 材料与方法 | 第16-23页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·菌株与质粒 | 第16页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第16页 |
| ·培养基与培养条件 | 第16-17页 |
| ·PCR 引物 | 第17页 |
| ·主要仪器与设备 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-23页 |
| ·分子克隆相关实验 | 第18页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第18页 |
| ·NB-C1 基因重组表达载体的构建 | 第18页 |
| ·大肠杆菌重组表达菌株的构建 | 第18-19页 |
| ·重组载体在大肠杆菌中的诱导表达 | 第19页 |
| ·重组载体在大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中的表达 | 第19-20页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第20页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE 蛋白质凝胶电泳 | 第20-21页 |
| ·Ni-NTA 亲和层析柱纯化重组蛋白 | 第21-22页 |
| ·重组蛋白活性检测 | 第22-23页 |
| 3. 结果与讨论 | 第23-35页 |
| ·细菌素基因NB-C1 的克隆及表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·NB-C1、GFP 及TrxA 片段的扩增 | 第23页 |
| ·NB-C1 基因表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·重组载体在大肠杆菌中的表达 | 第25-27页 |
| ·重组载体在大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中的表达 | 第27-29页 |
| ·间歇式无细胞反应 | 第27-28页 |
| ·连续交换式无细胞（CECF）反应 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白的亲和层析纯化 | 第29-30页 |
| ·重组大肠杆菌表达产物的纯化 | 第29-30页 |
| ·无细胞系统合成蛋白质的纯化 | 第30页 |
| ·重组蛋白的活性检测 | 第30-33页 |
| ·NB-C1 基因不同表达策略表达水平及活性的比较 | 第33-35页 |
| 4. 主要结论 | 第35-36页 |
| 存在的问题与展望 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |