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鸡IBV感染对气管黏膜固有免疫相关基因表达影响初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 前言第12-21页
   ·从分子水平研究鸡传染性支气管炎病毒免疫应答的进展第12-16页
     ·IBV的分子免疫学结构第12-14页
       ·结构蛋白第12-13页
       ·非结构蛋白第13-14页
     ·固有免疫第14页
     ·获得性免疫第14-15页
     ·黏膜免疫第15-16页
     ·小结与展望第16页
   ·实时荧光定量PCR技术第16-19页
     ·实时荧光定量PCR的分类第16-18页
     ·实时荧光定量PCR的数据处理方法第18-19页
     ·实时荧光定量PCR内参的选择第19页
   ·本课题研究的背景、目的和意义第19-21页
第二章 感染IBV后鸡气管黏膜基因表达实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择第21-34页
   ·试验材料第21-22页
     ·病毒第21页
     ·试验的动物第21-22页
     ·主要试剂第22页
     ·载体和感受态细胞第22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·方法第22-26页
     ·动物实验第22页
     ·样品采集第22页
     ·气管黏膜组织总RNA的提取第22-23页
     ·鉴定总RNA的完整性第23页
     ·反转录第23页
     ·选择候选内参基因并合成引物第23页
     ·PCR扩增候选内参基因片段第23-25页
     ·纯化回收候选内参基因片段第25页
     ·连接纯化回收产物第25页
     ·连接产物转化感受态细胞第25页
     ·阳性克隆的鉴定第25页
     ·克隆片段的序列测定第25页
     ·制备标准品第25页
     ·实时荧光定量PCR第25-26页
     ·数据分析第26页
   ·试验结果第26-32页
     ·RNA的完整性第26-27页
     ·PCR扩增候选内参基因片段第27页
     ·测序结果第27页
     ·实时荧光定量PCR标准曲线扩增效率第27-29页
     ·实时荧光定量PCR溶解曲线分析第29-30页
     ·候选内参基因在鸡气管黏膜中的表达丰度第30-31页
     ·内参基因稳定性比较第31-32页
   ·小结与讨论第32-34页
第三章 IBV感染对鸡气管黏膜固有免疫相关基因MRNA转录的影响第34-51页
   ·材料第34-35页
     ·病毒第34页
     ·试验动物第34-35页
     ·主要试剂第35页
     ·载体和感受态细胞第35页
     ·主要仪器设备第35页
   ·方法第35-38页
     ·动物实验第35页
     ·样品采集第35页
     ·气管黏膜组织总RNA的提取第35页
     ·鉴定总RNA的完整性第35页
     ·反转录第35页
     ·选择目的基因并合成引物第35-37页
     ·PCR扩增14个固有免疫相关基因片段第37页
     ·纯化回收目的基因片段第37页
     ·连接纯化回收产物第37页
     ·阳性克隆的鉴定第37页
     ·克隆片段的序列测定第37页
     ·制备标准品第37页
     ·实时荧光实时定量PCR第37-38页
     ·数据分析第38页
   ·试验结果第38-49页
     ·RNA的完整性第38页
     ·目的基因的PCR扩增第38-39页
     ·测序结果第39页
     ·实时荧光定量标准曲线扩增效率第39-44页
     ·实时荧光定量PCR溶解曲线分析第44-47页
     ·鸡感染IBV(GX-YL5)后气管黏膜固有免疫相关基因的表达动态第47-49页
       ·感染后不同时相固有免疫相关基因的表达变化第47-48页
       ·模式识别受体第48页
       ·白介素细胞因子第48页
       ·干扰素及其诱导因子第48页
       ·趋化因子与免疫细胞运输因子第48-49页
   ·小结与讨论第49-51页
第四章 结论第51-52页
参考文献第52-58页
致谢第58-59页
个人简历第59页
攻读硕士学位期间论文发表情况及参与的科研项目第59页

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