水牛胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-26页 |
| ·水牛简介(起源、分类及分布) | 第13页 |
| ·水牛相关研究的进展 | 第13-16页 |
| ·水牛核移植 | 第14页 |
| ·转基因水牛 | 第14-15页 |
| ·水牛干细胞 | 第15-16页 |
| ·动物组织体外培养简介 | 第16-17页 |
| ·细胞培养的探索阶段 | 第16页 |
| ·培养技术的高速发展、成熟阶段 | 第16-17页 |
| ·细胞大量培养技术的应用 | 第17页 |
| ·成纤维细胞简介及研究进展 | 第17-19页 |
| ·耳部成纤维细胞 | 第18页 |
| ·皮肤成纤维细胞 | 第18页 |
| ·肾脏成纤维细胞 | 第18-19页 |
| ·细胞系建立所需生物学相关特性的检测 | 第19-21页 |
| ·细胞生长曲线和细胞活率的测定 | 第19页 |
| ·微生物污染检测 | 第19-20页 |
| ·核型分析 | 第20页 |
| ·同工酶检测 | 第20页 |
| ·细胞转染效率 | 第20-21页 |
| ·细胞系的具体应用 | 第21-24页 |
| ·在生命科学研究方面的应用 | 第21-22页 |
| ·医学方面的应用 | 第22-23页 |
| ·农业方面的应用 | 第23页 |
| ·生物制品的生产 | 第23-24页 |
| ·本研究的主要目的、内容和意义 | 第24-26页 |
| ·主要目的 | 第25页 |
| ·主要内容 | 第25页 |
| ·主要意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-30页 |
| ·设备 | 第26-27页 |
| ·水牛胎儿 | 第27页 |
| ·质粒与引物 | 第27-28页 |
| ·培养基与试剂 | 第28-29页 |
| ·其他试剂 | 第29-30页 |
| ·细胞学操作 | 第30-34页 |
| ·原代组织块培养 | 第31页 |
| ·细胞分离、纯化 | 第31-32页 |
| ·细胞传代、冻存、复苏 | 第32-33页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第33页 |
| ·细胞活率测定 | 第33-34页 |
| ·分子生物学操作 | 第34-35页 |
| ·PCR法检测支原体 | 第34页 |
| ·细胞类型的免疫组化检测 | 第34-35页 |
| ·细胞转染 | 第35页 |
| ·生物化学操作 | 第35-38页 |
| ·同工酶检测 | 第35-37页 |
| ·核型分析 | 第37页 |
| ·细胞周期检测 | 第37-38页 |
| ·Hoechst 33342染色法检测支原体 | 第38页 |
| ·微生物学操作 | 第38-40页 |
| ·细菌、真菌检测 | 第38-39页 |
| ·病毒检测 | 第39-40页 |
| 第三章 试验结果与分析 | 第40-61页 |
| ·原代组织块培养所获得的细胞系 | 第40-41页 |
| ·原代组织块培养 | 第40页 |
| ·细胞消化、传代 | 第40-41页 |
| ·各细胞系细胞类型鉴定 | 第41-43页 |
| ·各细胞系生长曲线 | 第43-45页 |
| ·各细胞系冻存活率 | 第45页 |
| ·各细胞系微生物检测 | 第45-50页 |
| ·真菌、细菌检测结果 | 第46-48页 |
| ·支原体检测结果 | 第48-49页 |
| ·病毒检测结果 | 第49-50页 |
| ·各细胞系同工酶检测结果 | 第50-52页 |
| ·乳酸脱氢酶(LDH)检测结果 | 第50-51页 |
| ·苹果酸脱氢酶(MDH)检测结果 | 第51-52页 |
| ·各细胞系核型分析结果 | 第52-55页 |
| ·各细胞系细胞周期分析 | 第55-58页 |
| ·各细胞系转染效率测定 | 第58-61页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第61-68页 |
| ·讨论 | 第61-66页 |
| ·原代培养材料的选择 | 第61页 |
| ·微生物污染及细胞的无抗培养 | 第61-62页 |
| ·细胞培养体系 | 第62-63页 |
| ·细胞操作的优化 | 第63页 |
| ·细胞生长动力学特性 | 第63页 |
| ·细胞多倍体的产生 | 第63-64页 |
| ·核型分析及同工酶检测 | 第64页 |
| ·细胞转染体系的优化 | 第64-65页 |
| ·细胞周期分析 | 第65-66页 |
| ·结论 | 第66页 |
| ·展望 | 第66-68页 |
| 附章 水牛诱导多能干细胞(iPSCs)的初步研究 | 第68-80页 |
| 附.1 研究意义、目的 | 第68-69页 |
| 附.2 试验材料和方法 | 第69-74页 |
| 附.2.1 试验材料 | 第69-71页 |
| 附.2.2 试验方法 | 第71-74页 |
| 附.3 部分试验结果 | 第74-77页 |
| 附.3.1 质粒PCR验证 | 第74页 |
| 附.3.2 慢病毒包装体系的优化 | 第74-77页 |
| 附.4 分析及讨论 | 第77-79页 |
| 附.4.1 慢病毒包装体系的优化 | 第77-78页 |
| 附.4.2 慢病毒感染细胞 | 第78-79页 |
| 附.5 本章试验进展总结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-90页 |
| 附录 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第92页 |
