中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英语缩略词表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-15页 |
1 实验材料 | 第15-22页 |
·实验动物 | 第15页 |
·实验试剂 | 第15-21页 |
·质粒 | 第15-16页 |
·菌株 | 第16页 |
·病毒株 | 第16页 |
·细胞株 | 第16页 |
·主要化学试剂 | 第16-17页 |
·试剂与耗材 | 第17页 |
·试剂盒 | 第17页 |
·主要抗体 | 第17-18页 |
·E.coli用培养基的配制 | 第18页 |
·制备感受态细胞的相关溶液 | 第18页 |
·抗生素的配制 | 第18页 |
·大量提取质粒DNA的相关溶液 | 第18-19页 |
·DNA琼脂糖凝胶电泳缓冲液及凝胶的配制 | 第19页 |
·细胞冻存液的配制 | 第19页 |
·细胞裂解液的配制 | 第19页 |
·SDS-PAGE蛋白质电泳及相关缓冲液的配制 | 第19-20页 |
·蛋白纯化相关缓冲液配制 | 第20页 |
·常用缓冲液的配制 | 第20页 |
·鸡血细胞溶液的制备 | 第20-21页 |
·血凝单位抗原的配制 | 第21页 |
·主要仪器及设备 | 第21-22页 |
2 实验方法 | 第22-30页 |
·病毒接种回收及滴度测定 | 第22-25页 |
·鸡胚的孵育及检卵 | 第22-23页 |
·H1N1病毒鸡胚接种方法 | 第23页 |
·鸡胚尿囊液收毒 | 第23-24页 |
·回收病毒血凝效价测定 | 第24页 |
·病毒滴度(TCID5G)测定 | 第24-25页 |
·贴壁细胞的培养 | 第25页 |
·稳定表达细胞株的构建 | 第25页 |
·细胞冻存 | 第25-26页 |
·细胞复苏 | 第26页 |
·细胞裂解 | 第26页 |
·用流感病毒感染细胞Western Blotting检测样品处理 | 第26页 |
·蛋白纯化 | 第26-27页 |
·用流式细胞术检测表达蛋白的活性 | 第27页 |
·Western Blotting的检测方法 | 第27-28页 |
·流感病毒感染细胞实验 | 第28-29页 |
·流感病毒感染细胞后的免疫荧光检测 | 第29页 |
·MTT检测 | 第29-30页 |
3 实验结果 | 第30-42页 |
·病毒在鸡胚中的扩增及滴度测定 | 第30-31页 |
·H1N1病毒在细胞中的感染及其检测工作 | 第31-35页 |
·观察Seasonal H1N1及Swine-origin H1N1感染细胞 | 第31-32页 |
·免疫荧光检测两种病毒在A549、Hep-2、CNE-2Z、H1650和MRC-5细胞中的感染效率差异 | 第32-34页 |
·免疫荧光检测不同滴度Swine-origin H1N1在A549、Hep-2、CNE-2Z、H1650和MRC-5细胞中的感染效率差异 | 第34页 |
·不同滴度病毒感染5种细胞后感染效率的差异检测 | 第34-35页 |
·Seasonal H1N1病毒感染细胞后不同抗体的24 h免疫荧光实验 | 第35-36页 |
·Seasonal H1N1病毒在不同时间点感染细胞后的分布 | 第36-37页 |
·胰酶对病毒感染细胞效率的影响 | 第37页 |
·mtt检测细胞的活性 | 第37-39页 |
·抑制因子对病毒侵入细胞抑制率的影响 | 第39-42页 |
·病毒在A549细胞中的感染蛋白抑制试验 | 第39-40页 |
·7种抑制因子对病毒侵入细胞抑制率的检测 | 第40-42页 |
讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
致谢 | 第48-50页 |
个人简历 | 第50-51页 |