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牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4基因真核表达载体的构建及皮肤成纤维细胞转染

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
文献综述第10-22页
 第一章 诱导性多潜能干细胞研究概述第10-22页
   ·胚胎干细胞的多能性与自我更新第10-13页
     ·胚胎干细胞多能性调节有关的转录因子第10-11页
     ·干细胞自我更新与细胞周期调控的关系第11-13页
   ·iPS 细胞研究概述第13页
   ·细胞核重编程技术概述第13-15页
     ·体细胞核移植第13-14页
     ·细胞融合第14-15页
     ·体细胞与多能性细胞提取物共孵育第15页
     ·多能性相关因子介导的细胞核重编程第15页
   ·iPS 细胞相关的转录因子第15-19页
     ·Oct4第16页
     ·Sox2第16-17页
     ·c-Myc第17-18页
     ·Klf4第18页
     ·其它的转录因子或小分子第18页
     ·转录因子之间的相互作用第18-19页
   ·iPS 细胞的应用及研究意义第19-21页
     ·生产转基因动物第20页
     ·复制濒危的动物物种第20页
     ·性别控制第20页
     ·临床疾病治疗第20-21页
     ·药物筛选第21页
   ·诱导多能干细胞存在的问题与展望第21-22页
实验部分第22-41页
 第二章 牛 Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因的克隆与序列分析第22-28页
   ·材料和方法第22-26页
     ·材料与试剂第22-23页
     ·实验方法第23-26页
   ·结果第26-27页
     ·牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因PCR 扩增结果第26-27页
     ·序列测序比对结果第27页
   ·讨论第27页
   ·小结第27-28页
 第三章 牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因真核表达载体的构建与鉴定第28-34页
   ·材料和方法第28-30页
     ·材料第28-29页
     ·方法第29-30页
   ·牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因真核表达载体表达的检测第30-31页
     ·重组质粒的纯化第30-31页
     ·重组质粒转染293FT 细胞第31页
     ·Western blotting 检测蛋白表达第31页
   ·结果第31-33页
     ·酶切鉴定结果第31-32页
     ·重组质粒分别转染293FT 细胞及其表达结果检测第32-33页
   ·讨论第33页
   ·小结第33-34页
 第四章 牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因真核表达载体的转染和筛选第34-41页
   ·材料与方法第34-38页
     ·材料与试剂第34页
     ·方法第34-38页
   ·结果第38-39页
     ·重组质粒构建结果第38页
     ·重组质粒转染牛成纤维细胞后PCR 检测结果第38-39页
     ·牛胎儿成纤维细胞筛选液的药物筛选浓度第39页
     ·牛胎儿成纤维细胞的培养与筛选第39页
   ·讨论第39页
   ·小结第39-41页
结论第41-42页
下一步研究内容第42-43页
参考文献第43-53页
附录第53-65页
英文缩略词表第65-66页
致谢第66-67页
个人简介第67页

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