摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
文献综述 | 第10-22页 |
第一章 诱导性多潜能干细胞研究概述 | 第10-22页 |
·胚胎干细胞的多能性与自我更新 | 第10-13页 |
·胚胎干细胞多能性调节有关的转录因子 | 第10-11页 |
·干细胞自我更新与细胞周期调控的关系 | 第11-13页 |
·iPS 细胞研究概述 | 第13页 |
·细胞核重编程技术概述 | 第13-15页 |
·体细胞核移植 | 第13-14页 |
·细胞融合 | 第14-15页 |
·体细胞与多能性细胞提取物共孵育 | 第15页 |
·多能性相关因子介导的细胞核重编程 | 第15页 |
·iPS 细胞相关的转录因子 | 第15-19页 |
·Oct4 | 第16页 |
·Sox2 | 第16-17页 |
·c-Myc | 第17-18页 |
·Klf4 | 第18页 |
·其它的转录因子或小分子 | 第18页 |
·转录因子之间的相互作用 | 第18-19页 |
·iPS 细胞的应用及研究意义 | 第19-21页 |
·生产转基因动物 | 第20页 |
·复制濒危的动物物种 | 第20页 |
·性别控制 | 第20页 |
·临床疾病治疗 | 第20-21页 |
·药物筛选 | 第21页 |
·诱导多能干细胞存在的问题与展望 | 第21-22页 |
实验部分 | 第22-41页 |
第二章 牛 Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因的克隆与序列分析 | 第22-28页 |
·材料和方法 | 第22-26页 |
·材料与试剂 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-26页 |
·结果 | 第26-27页 |
·牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因PCR 扩增结果 | 第26-27页 |
·序列测序比对结果 | 第27页 |
·讨论 | 第27页 |
·小结 | 第27-28页 |
第三章 牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因真核表达载体的构建与鉴定 | 第28-34页 |
·材料和方法 | 第28-30页 |
·材料 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-30页 |
·牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因真核表达载体表达的检测 | 第30-31页 |
·重组质粒的纯化 | 第30-31页 |
·重组质粒转染293FT 细胞 | 第31页 |
·Western blotting 检测蛋白表达 | 第31页 |
·结果 | 第31-33页 |
·酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
·重组质粒分别转染293FT 细胞及其表达结果检测 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33页 |
·小结 | 第33-34页 |
第四章 牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4 基因真核表达载体的转染和筛选 | 第34-41页 |
·材料与方法 | 第34-38页 |
·材料与试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·结果 | 第38-39页 |
·重组质粒构建结果 | 第38页 |
·重组质粒转染牛成纤维细胞后PCR 检测结果 | 第38-39页 |
·牛胎儿成纤维细胞筛选液的药物筛选浓度 | 第39页 |
·牛胎儿成纤维细胞的培养与筛选 | 第39页 |
·讨论 | 第39页 |
·小结 | 第39-41页 |
结论 | 第41-42页 |
下一步研究内容 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-53页 |
附录 | 第53-65页 |
英文缩略词表 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简介 | 第67页 |