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转HBsAg基因导致樱桃番茄突变体发生规律的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一部分 绪论第9-20页
 1 转基因植物突变体的研究概况第9-14页
   ·染色体(DNA)倍性变化第9-11页
   ·染色体的其他畸变第11-12页
   ·表型变异第12-13页
   ·转基因植株后代的不稳定性第13-14页
   ·在组培过程中转基因植物生理生化方面的变异第14页
 2 转基因植株突变的原因第14-17页
   ·组织培养第14-16页
   ·植物遗传转化过程第16-17页
   ·植物繁殖与育种第17页
 3 研究基础第17-18页
 4 本文研究目的及意义第18-20页
第二部分 实验材料与方法第20-35页
 一 实验材料第20-21页
  1 植物材料第20页
  2 质粒和菌株第20页
  3 主要试剂及试剂盒第20页
  4 主要试剂的配制第20页
  5 主要设备第20-21页
  6 基本培养基第21页
 二 实验方法第21-35页
  1 转HBsAg基因樱桃番茄株系的建立第21-30页
   ·pCAMB1A1301/HB质粒的提取第21-22页
   ·植物表达载体pCAMBIA1301/HB导入根癌农杆菌LBA4404第22-23页
   ·农杆菌重组质粒的鉴定第23-24页
   ·樱桃番茄高效再生体系的建立第24-25页
   ·农杆菌介导的HBsAg基因对樱桃番茄的遗传转化第25-26页
   ·转基因樱桃番茄植株的鉴定第26-30页
  2 转pCAMBIA1301空载体樱桃番茄株系的建立第30-31页
   ·农杆菌LBA4404(内含pCAMBIA1301空载体)对樱桃番茄的遗传转化第30页
   ·转基因樱桃番茄的鉴定第30-31页
  3 转基因植株的细胞学及生理指标的变异分析第31-35页
   ·气孔保卫细胞叶绿体的观察第31页
   ·流式细胞仪对DNA倍性的检验第31页
   ·叶绿素含量检测第31-32页
   ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定第32-33页
   ·过氧化物酶(POD)活性测定第33页
   ·过氧化氢酶(CAT)活性测定第33-34页
   ·丙二醛(MDA)含量的测定第34-35页
第三部分 结果与分析第35-45页
 1 转基因樱桃番茄株系的建立第35-41页
   ·转化农杆菌的PCR鉴定第35-36页
   ·樱桃番茄高效再生体系的建立第36-37页
     ·不同激素组合对樱桃番茄外植体不定芽分化数目和生长的影响第36-37页
     ·樱桃番茄对潮霉素(Hyg)的敏感性测定第37页
   ·农杆菌转化樱桃番茄条件优化第37-39页
     ·不同苗龄和外植体类型对樱桃番茄转化率的影响第37页
     ·不同农杆菌浓度和侵染时间对樱桃番茄转化率的影响第37-39页
   ·转基因樱桃番茄的获得第39页
   ·转基因樱桃番茄的鉴定第39-41页
     ·转基因樱桃番茄的PCR检测第39-40页
     ·转基因樱桃番茄的southern杂交检测第40-41页
 2 转基因樱桃番茄细胞学观察第41页
   ·气孔保卫细胞叶绿体观察第41页
   ·DNA倍性检测第41页
 3 转基因樱桃番茄生理指标的变异分析第41-45页
第四部分 讨论第45-48页
 1 植物离体再生过程中的外源激素第45页
 2 遗传转化体系的优化第45-46页
 3 关于转基因植株细胞变异问题第46-48页
第五部分 结论第48-49页
参考文献第49-55页
图版:转基因樱桃番茄的不同生长阶段第55-56页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第56-57页
致谢第57页

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