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Nlrp基因家族的表达及Nlrp2和Nlrp4g在小鼠早期胚胎发育过程中的功能

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
文献综述第15-37页
 第一章 小鼠附植前胚胎发育的研究进展第15-28页
   ·小鼠附植前胚胎发育的主要特征第15页
   ·附植前胚胎的全基因表达谱概述第15-18页
   ·附植前胚胎发育的第一次谱系分化第18-25页
     ·谱系分化的经典模型第18页
     ·支持谱系分化模型的证据第18-19页
     ·影响滋养外胚层形成和功能的蛋白第19-24页
     ·调控滋养外胚层分化的信号通路第24-25页
     ·内细胞团的形成第25页
   ·附植前胚胎发育的第二次谱系分化第25-28页
     ·第二次谱系分化的模型第25-27页
     ·调控第二次谱系分化的信号通路第27-28页
 第二章 NLRP 基因家族的研究进展第28-37页
   ·NLRP 基因家族的发现、命名及书写第28页
   ·NLRP 基因家族的结构第28-29页
   ·NLRP 基因家族在不同哺乳动物中的成员第29-32页
   ·NLRP 基因家族的进化第32-33页
   ·NLRP 基因家族的功能第33-37页
     ·NLRP 基因家族在动物先天免疫系统中的作用第33页
     ·NLRP 基因家族在动物生殖系统中的作用第33-37页
实验研究第37-105页
 第三章 Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠上的表达第37-45页
   ·材料和方法第37-40页
     ·动物第37页
     ·主要试剂第37页
     ·卵母细胞和胚胎的收集第37-38页
     ·精子的收集第38页
     ·细胞培养第38页
     ·RNA 的提取和 cDNA 的合成第38页
     ·cDNA 的扩增第38-40页
   ·结果第40-43页
     ·Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠附植前胚胎中的表达第40-41页
     ·Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠不同组织中的表达第41-42页
     ·Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠不同细胞中的表达第42-43页
   ·讨论第43-44页
   ·小结第44-45页
 第四章 Nlrp4a-Nlrp4f 在小鼠发育过程中的表达分析第45-54页
   ·材料和方法第45-47页
     ·动物第45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·卵母细胞和胚胎的收集第46页
     ·精子的收集第46页
     ·细胞培养第46页
     ·RNA 的提取和 cDNA 的合成第46页
     ·实时定量 RT-PCR第46-47页
     ·数据处理第47页
   ·结果第47-52页
     ·Nlrp4a–Nlrp4f 在小鼠附植前胚胎中的表达第47页
     ·Nlrp4a–Nlrp4f 在小鼠组织中的表达第47页
     ·Nlrp4b–Nlrp4e 的表达随着小鼠年龄的增加而下降第47-48页
     ·Nlrp4a–Nlrp4f 在小鼠不同细胞中的表达第48-52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
 第五章 Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠发育过程中的时空表达第54-64页
   ·材料和方法第54-56页
     ·动物第54页
     ·主要试剂第54-55页
     ·卵母细胞和胚胎的收集第55页
     ·胚胎的原位杂交第55页
     ·细胞培养第55页
     ·精子的收集第55页
     ·RNA 的提取和 cDNA 的合成第55页
     ·RT-PCR 和实时定量 PCR第55-56页
     ·数据处理第56页
   ·结果第56-61页
     ·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠附植前胚胎中的表达第56-57页
     ·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠附植后胚胎中的表达第57-59页
     ·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠不同组织中的表达第59-60页
     ·Nlrp9a 和 Nlrp9c 在卵巢中的表达随着小鼠年龄的增加而下降第60-61页
     ·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠不同细胞中的表达第61页
   ·讨论第61-63页
   ·小结第63-64页
 第六章 小鼠早期胚胎的发育需要 Nlrp2 基因的参与第64-86页
   ·材料和方法第65-70页
     ·动物第65页
     ·主要试剂第65页
     ·卵母细胞和胚胎的收集与培养第65-66页
     ·卵母细胞的孤雌激活第66页
     ·精子的收集第66页
     ·细胞培养第66页
     ·RNA 的提取和实时定量 RT-PCR第66-67页
     ·原位杂交第67页
     ·免疫组化第67页
     ·免疫印迹第67-68页
     ·免疫荧光第68页
     ·免疫电镜分析第68页
     ·GV 期卵母细胞和合子的电转第68-69页
     ·Nlrp2 表达载体的构建和显微注射第69页
     ·TUNEL 凋亡检测第69页
     ·数据分析第69-70页
   ·结果第70-84页
     ·Nlrp2 mRNA 的表达水平第70-71页
     ·NLRP2 蛋白的表达第71-72页
     ·NLRP2 蛋白的细胞和亚细胞定位第72页
     ·Nlrp2 在孤雌胚胎中的表达和定位第72页
     ·卵母细胞的成熟不需要 Nlrp2 的参与第72页
     ·卵母细胞中 Nlrp2 的沉默导致孤雌激活后早期胚胎发育阻滞第72-78页
     ·合子中 Nlrp2 的沉默造成早期胚胎发育阻滞第78-81页
     ·在合子中过表达 Nlrp2 增加囊胚的细胞凋亡第81-84页
   ·讨论第84-85页
   ·小结第85-86页
 第七章 母源性沉默 Nlrp4g 阻滞早期胚胎发育第86-105页
   ·材料和方法第86-90页
     ·动物第86页
     ·主要试剂第86-87页
     ·卵母细胞和胚胎的收集与培养第87页
     ·卵母细胞的孤雌激活第87页
     ·RNA 的提取和实时定量 RT-PCR第87-88页
     ·免疫印迹第88页
     ·原位杂交第88-89页
     ·免疫组化第89页
     ·免疫荧光第89页
     ·免疫电镜分析第89-90页
     ·GV 期卵母细胞和合子的显微注射第90页
     ·数据分析第90页
   ·结果第90-102页
     ·抗体特异性第90-91页
     ·Nlrp4g 的表达贯穿整个卵子发生第91页
     ·Nlrp4g 的表达随着年龄的增加而下降第91页
     ·Nlrp4g 在附植前胚胎中的表达第91-95页
     ·NLRP4G 的细胞和亚细胞定位第95页
     ·Nlrp4g 在孤雌胚胎中的表达和定位第95页
     ·卵母细胞的成熟不需要 Nlrp4g 的参与第95-100页
     ·在合子中沉默 Nlrp4g 导致早期胚胎发育阻滞第100-102页
   ·讨论第102-104页
   ·小结第104-105页
结论第105-106页
论文创新点第106-107页
参考文献第107-123页
附录第123-124页
缩略词第124-126页
致谢第126-127页
个人简介第127页

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