摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
文献综述 | 第15-37页 |
第一章 小鼠附植前胚胎发育的研究进展 | 第15-28页 |
·小鼠附植前胚胎发育的主要特征 | 第15页 |
·附植前胚胎的全基因表达谱概述 | 第15-18页 |
·附植前胚胎发育的第一次谱系分化 | 第18-25页 |
·谱系分化的经典模型 | 第18页 |
·支持谱系分化模型的证据 | 第18-19页 |
·影响滋养外胚层形成和功能的蛋白 | 第19-24页 |
·调控滋养外胚层分化的信号通路 | 第24-25页 |
·内细胞团的形成 | 第25页 |
·附植前胚胎发育的第二次谱系分化 | 第25-28页 |
·第二次谱系分化的模型 | 第25-27页 |
·调控第二次谱系分化的信号通路 | 第27-28页 |
第二章 NLRP 基因家族的研究进展 | 第28-37页 |
·NLRP 基因家族的发现、命名及书写 | 第28页 |
·NLRP 基因家族的结构 | 第28-29页 |
·NLRP 基因家族在不同哺乳动物中的成员 | 第29-32页 |
·NLRP 基因家族的进化 | 第32-33页 |
·NLRP 基因家族的功能 | 第33-37页 |
·NLRP 基因家族在动物先天免疫系统中的作用 | 第33页 |
·NLRP 基因家族在动物生殖系统中的作用 | 第33-37页 |
实验研究 | 第37-105页 |
第三章 Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠上的表达 | 第37-45页 |
·材料和方法 | 第37-40页 |
·动物 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·卵母细胞和胚胎的收集 | 第37-38页 |
·精子的收集 | 第38页 |
·细胞培养 | 第38页 |
·RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第38页 |
·cDNA 的扩增 | 第38-40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠附植前胚胎中的表达 | 第40-41页 |
·Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠不同组织中的表达 | 第41-42页 |
·Nlrp 基因家族中免疫相关基因在小鼠不同细胞中的表达 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-45页 |
第四章 Nlrp4a-Nlrp4f 在小鼠发育过程中的表达分析 | 第45-54页 |
·材料和方法 | 第45-47页 |
·动物 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-46页 |
·卵母细胞和胚胎的收集 | 第46页 |
·精子的收集 | 第46页 |
·细胞培养 | 第46页 |
·RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第46页 |
·实时定量 RT-PCR | 第46-47页 |
·数据处理 | 第47页 |
·结果 | 第47-52页 |
·Nlrp4a–Nlrp4f 在小鼠附植前胚胎中的表达 | 第47页 |
·Nlrp4a–Nlrp4f 在小鼠组织中的表达 | 第47页 |
·Nlrp4b–Nlrp4e 的表达随着小鼠年龄的增加而下降 | 第47-48页 |
·Nlrp4a–Nlrp4f 在小鼠不同细胞中的表达 | 第48-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第五章 Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠发育过程中的时空表达 | 第54-64页 |
·材料和方法 | 第54-56页 |
·动物 | 第54页 |
·主要试剂 | 第54-55页 |
·卵母细胞和胚胎的收集 | 第55页 |
·胚胎的原位杂交 | 第55页 |
·细胞培养 | 第55页 |
·精子的收集 | 第55页 |
·RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第55页 |
·RT-PCR 和实时定量 PCR | 第55-56页 |
·数据处理 | 第56页 |
·结果 | 第56-61页 |
·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠附植前胚胎中的表达 | 第56-57页 |
·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠附植后胚胎中的表达 | 第57-59页 |
·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠不同组织中的表达 | 第59-60页 |
·Nlrp9a 和 Nlrp9c 在卵巢中的表达随着小鼠年龄的增加而下降 | 第60-61页 |
·Nlrp9a-Nlrp9c 在小鼠不同细胞中的表达 | 第61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
·小结 | 第63-64页 |
第六章 小鼠早期胚胎的发育需要 Nlrp2 基因的参与 | 第64-86页 |
·材料和方法 | 第65-70页 |
·动物 | 第65页 |
·主要试剂 | 第65页 |
·卵母细胞和胚胎的收集与培养 | 第65-66页 |
·卵母细胞的孤雌激活 | 第66页 |
·精子的收集 | 第66页 |
·细胞培养 | 第66页 |
·RNA 的提取和实时定量 RT-PCR | 第66-67页 |
·原位杂交 | 第67页 |
·免疫组化 | 第67页 |
·免疫印迹 | 第67-68页 |
·免疫荧光 | 第68页 |
·免疫电镜分析 | 第68页 |
·GV 期卵母细胞和合子的电转 | 第68-69页 |
·Nlrp2 表达载体的构建和显微注射 | 第69页 |
·TUNEL 凋亡检测 | 第69页 |
·数据分析 | 第69-70页 |
·结果 | 第70-84页 |
·Nlrp2 mRNA 的表达水平 | 第70-71页 |
·NLRP2 蛋白的表达 | 第71-72页 |
·NLRP2 蛋白的细胞和亚细胞定位 | 第72页 |
·Nlrp2 在孤雌胚胎中的表达和定位 | 第72页 |
·卵母细胞的成熟不需要 Nlrp2 的参与 | 第72页 |
·卵母细胞中 Nlrp2 的沉默导致孤雌激活后早期胚胎发育阻滞 | 第72-78页 |
·合子中 Nlrp2 的沉默造成早期胚胎发育阻滞 | 第78-81页 |
·在合子中过表达 Nlrp2 增加囊胚的细胞凋亡 | 第81-84页 |
·讨论 | 第84-85页 |
·小结 | 第85-86页 |
第七章 母源性沉默 Nlrp4g 阻滞早期胚胎发育 | 第86-105页 |
·材料和方法 | 第86-90页 |
·动物 | 第86页 |
·主要试剂 | 第86-87页 |
·卵母细胞和胚胎的收集与培养 | 第87页 |
·卵母细胞的孤雌激活 | 第87页 |
·RNA 的提取和实时定量 RT-PCR | 第87-88页 |
·免疫印迹 | 第88页 |
·原位杂交 | 第88-89页 |
·免疫组化 | 第89页 |
·免疫荧光 | 第89页 |
·免疫电镜分析 | 第89-90页 |
·GV 期卵母细胞和合子的显微注射 | 第90页 |
·数据分析 | 第90页 |
·结果 | 第90-102页 |
·抗体特异性 | 第90-91页 |
·Nlrp4g 的表达贯穿整个卵子发生 | 第91页 |
·Nlrp4g 的表达随着年龄的增加而下降 | 第91页 |
·Nlrp4g 在附植前胚胎中的表达 | 第91-95页 |
·NLRP4G 的细胞和亚细胞定位 | 第95页 |
·Nlrp4g 在孤雌胚胎中的表达和定位 | 第95页 |
·卵母细胞的成熟不需要 Nlrp4g 的参与 | 第95-100页 |
·在合子中沉默 Nlrp4g 导致早期胚胎发育阻滞 | 第100-102页 |
·讨论 | 第102-104页 |
·小结 | 第104-105页 |
结论 | 第105-106页 |
论文创新点 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-123页 |
附录 | 第123-124页 |
缩略词 | 第124-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
个人简介 | 第127页 |