| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-18页 |
| 1．1 马铃薯病毒病的发生和危害 | 第8-9页 |
| 1．2 马铃薯Y病毒 | 第9-11页 |
| 1．2．1 马铃薯Y病毒生物学特性 | 第9-10页 |
| 1．2．2 马铃薯Y病毒分子生物学特性 | 第10-11页 |
| 1．3 马铃薯Y病毒的防治 | 第11-12页 |
| 1．4 马铃薯Y病毒的检测技术 | 第12-16页 |
| 1．4．1 生物学检测 | 第12页 |
| 1．4．2 电镜技术 | 第12-13页 |
| 1．4．3 免疫学检测技术 | 第13-14页 |
| 1．4．4 核酸检测技术 | 第14-16页 |
| 1．5 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-29页 |
| 2．1 材料 | 第18页 |
| 2．1．1 供试毒源、马铃薯种薯和脱毒苗 | 第18页 |
| 2．1．2 菌株 | 第18页 |
| 2．1．3 试剂 | 第18页 |
| 2．1．4 溶液、缓冲液和灭菌 | 第18页 |
| 2．2 方法 | 第18-29页 |
| 2．2．1 病毒的提纯 | 第18-19页 |
| 2．2．2 病毒粒体的电镜观察 | 第19-20页 |
| 2．2．3 病毒RNA的提纯 | 第20页 |
| 2．2．4 引物的设计和合成 | 第20页 |
| 2．2．5 目的片段的克隆 | 第20-24页 |
| 2．2．6 目的片段的DNA序列测定和分析 | 第24页 |
| 2．2．7 地高辛标记的cDNA探针的制备 | 第24-25页 |
| 2．2．8 植物总RNA的提取 | 第25页 |
| 2．2．9 植物总核酸的提取 | 第25页 |
| 2．2．10 利用核酸点杂交法检测马铃薯Y病毒 | 第25-27页 |
| 2．2．11 核酸点杂交检测试剂盒的组成及操作指南 | 第27页 |
| 2．2．12 试剂盒与RT-PCR、ELISA的灵敏度比较 | 第27-28页 |
| 2．2．13 试剂盒的应用 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-38页 |
| 3．1 病毒的提纯与鉴定 | 第29-31页 |
| 3．2 目的片段的克隆 | 第31-35页 |
| 3．2．1 RT-PCR扩增 | 第31页 |
| 3．2．2 RT-PCR产物的转化、筛选和鉴定 | 第31-32页 |
| 3．2．3 目的片段的序列分析与比较 | 第32-35页 |
| 3．3 核酸点杂交检测试剂盒的研制 | 第35-37页 |
| 3．3．1 探针的制备 | 第35-36页 |
| 3．3．2 试剂盒与RT-PCR及ELISA的灵敏度比较 | 第36-37页 |
| 3．4 试剂盒的应用 | 第37-38页 |
| 4． 讨论 | 第38-42页 |
| 4．1 马铃薯Y病毒的提纯 | 第38页 |
| 4．2 植物总核酸的提取 | 第38-40页 |
| 4．3 核酸点杂交检测试剂盒的评价 | 第40-41页 |
| 4．4 关于开展马铃薯检测试剂盒的研制及实行马铃薯种薯证书制，进一步提高我国种薯质量的建议 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录1 侵染马铃薯的病毒名称及其归属 | 第48-49页 |
| 附录2 马铃薯Y病毒核酸点杂交检测试剂盒的使用说明书 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
