摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
·鸡球虫的生物学特征 | 第13-17页 |
·鸡球虫病病原体种类及生物学特点 | 第13-14页 |
·鸡球虫的生活史 | 第14-16页 |
·鸡球虫病的诊断 | 第16-17页 |
·鸡球虫免疫原性研究进展 | 第17-19页 |
·阶段性抗原的表达 | 第17-18页 |
·虫体表面抗原的研究 | 第18-19页 |
·球虫感染的免疫学研究 | 第19-21页 |
·免疫的虫种特异性及免疫的消长 | 第19页 |
·细胞免疫应答 | 第19-20页 |
·体液免疫 | 第20-21页 |
·免疫调控 | 第21页 |
·鸡球虫疫苗研究进展 | 第21-25页 |
·活球虫疫苗 | 第21-22页 |
·分子疫苗 | 第22-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-37页 |
·试验材料 | 第25-28页 |
·菌株与质粒 | 第25页 |
·酶和试剂 | 第25页 |
·培养基及部分溶液的配制 | 第25-27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
·试验方法 | 第28-37页 |
·E.tenella 子孢子表面抗原 sag13、 sag14 的克隆 | 第28-31页 |
·DNA 片段与T 载体的连接 | 第31页 |
·E.coli Top10 感受态细胞制备及转化方法 | 第31-32页 |
·筛选阳性重组子 | 第32页 |
·原核表达载体的构建与转化 | 第32-35页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第35页 |
·表达产物的鉴定 | 第35-36页 |
·不同诱导条件下的蛋白表达 | 第36-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-49页 |
·表面抗原基因 sag13、sag14 的克隆及序列分析 | 第37-38页 |
·Eimeria tenella 子孢子总RNA 提取 | 第37页 |
·表面抗原基因 sag13 和 sag14 编码序列的克隆 | 第37-38页 |
·重组子的鉴定 | 第38-39页 |
·转化菌落的PCR 鉴定 | 第38页 |
·重组质粒 pGEM-sag13 和 pMD19-sag14 的酶切鉴定 | 第38-39页 |
·核苷酸序列测定及同源性分析 | 第39页 |
·重组表达载体的构建与验证 | 第39-42页 |
·重组表达载体 pET30a-sag13 的构建与验证 | 第39-41页 |
·重组表达载体 pET30a-sag14 的构建与验证 | 第41-42页 |
·重组大肠杆菌的诱导表达 | 第42-44页 |
·pET30a-sag13 重组大肠杆菌的诱导表达 | 第42-43页 |
·pET30a-sag14 重组大肠杆菌的诱导表达 | 第43-44页 |
·SAG13、SAG14 融合蛋白的 Western Blot | 第44-45页 |
·融合蛋白SAG13 表达条件的优化及其量化分析 | 第45-47页 |
·温度对蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
·IPTG 浓度对蛋白表达的影响 | 第46页 |
·Bradford 法定量融合蛋白SAG13 | 第46-47页 |
·融合蛋白SAG14 表达条件的优化及其量化分析 | 第47-49页 |
·温度对蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
·IPTG 浓度对蛋白表达的影响 | 第48页 |
·Bradford 法定量融合蛋白SAG14 | 第48-49页 |
第四章 讨论 | 第49-52页 |
第五章 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61-62页 |
附录 | 第62-64页 |