摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
·转录因子概述 | 第11页 |
·MYB转录因子研究进展 | 第11-13页 |
·MYB蛋白结构 | 第13-14页 |
·DNA结合域 | 第13页 |
·MYB蛋白与DNA的相互作用 | 第13-14页 |
·MYB蛋白C端转录激活域的多样性 | 第14页 |
·MYB转录因子的功能 | 第14-18页 |
·细胞分化 | 第15页 |
·细胞形态、形态建成的调控 | 第15-16页 |
·细胞程序性死亡 | 第16页 |
·细胞周期与增殖的调控 | 第16页 |
·苯丙烷类次级代谢的调节 | 第16-17页 |
·与端粒结合 | 第17页 |
·参与植物生物和非生物胁迫 | 第17-18页 |
·单一MYB结构域研究 | 第18页 |
·MYB基因活性调控 | 第18-19页 |
·MYB蛋白的进化 | 第19-20页 |
·总结 | 第20-21页 |
第二章 引言 | 第21-23页 |
第三章 实验材料与方法 | 第23-35页 |
·技术路线 | 第23页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·植物材料 | 第23-24页 |
·菌株与载体 | 第24页 |
·主要生化试剂 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·自配的主要试剂 | 第24-25页 |
·主要培养基 | 第25-26页 |
·实验技术手段 | 第26-35页 |
·1R-Myb1基因的cDNA克隆 | 第26-27页 |
·EST序列特征分析 | 第26页 |
·文库目标克隆子的获得 | 第26页 |
·目标克隆子特异引物PCR验证 | 第26页 |
·目标克隆子长度验证 | 第26-27页 |
·1R-Myb1基因生物信息学分析 | 第27页 |
·1R-Myb1基因cDNA序列结构分析 | 第27页 |
·1R-Myb1基因结构域分析和蛋白质特性分析 | 第27页 |
·非生物胁迫与半定量PCR(RT-PCR) | 第27-29页 |
·胁迫处理 | 第27页 |
·RNA提取 | 第27-28页 |
·RT-PCR分析 | 第28-29页 |
·1R-Myb1基因表达载体的构建 | 第29-35页 |
·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第29页 |
·质粒快速抽提法 | 第29-30页 |
·质粒DNA的纯化 | 第30页 |
·1R-Myb1基因质粒DNA限制性内切酶反应 | 第30页 |
·Watson Gel Extraction kit回收目的DNA片段 | 第30-31页 |
·pC2301载体的DNA限制性内切酶反应 | 第31页 |
·Watson Gel Extraction kit回收DNA载体片段 | 第31-32页 |
·植物表达载体pC2301-1R-Myb1的构建 | 第32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第32页 |
·农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第32-33页 |
·烟草的遗传转化 | 第33页 |
·转化植株的检测 | 第33-35页 |
第四章 结果与分析 | 第35-47页 |
·目标克隆子的EST序列特征 | 第35页 |
·1R-Myb1基因的全长cDNA的获得与基因命名 | 第35-36页 |
·氨基酸多序列比对 | 第36-37页 |
·1R-Myb1基因cDNA序列结构分析 | 第37-38页 |
·基因编码的蛋白质性质分析 | 第38-39页 |
·1R-MYB1蛋白的一级结构分析 | 第38页 |
·蜡梅1R-Myb1基因编码的1R-MYB1蛋白的结构域分析 | 第38-39页 |
·1R-MYB1蛋白的二级结构预测 | 第39-40页 |
·磷酸化位点预测 | 第40页 |
·非生物胁迫与PT-PCR | 第40-43页 |
·各个器官表达分析 | 第40-41页 |
·胁迫表达分析 | 第41-43页 |
·1R-Myb1基因植物表达载体构建 | 第43页 |
·表达载体的双酶切验证 | 第43-44页 |
·转基因烟草的获得 | 第44页 |
·转基因植株的生物学鉴定 | 第44-47页 |
·GUS组织化学染色 | 第44-45页 |
·PCR鉴定 | 第45-47页 |
第五章 讨论 | 第47-51页 |
第六章 总结 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
缩略词 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |