| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-17页 |
| 一、致病菌铁结合蛋白Fbp | 第12-13页 |
| 二、铁调素Hepcidin | 第13-14页 |
| 三、锰超氧化物歧化酶MnSOD | 第14-17页 |
| 第二章 铁传递蛋白及其突变体Y195F、Y196F和Y195F/Y196F的表达及纯化 | 第17-23页 |
| 一、仪器与试剂 | 第17-18页 |
| (一) 仪器 | 第17页 |
| (二) 试剂 | 第17-18页 |
| 二、实验方法 | 第18-20页 |
| (一) Y195F蛋白Tyr196位点的突变 | 第18-19页 |
| (二) holo-Fbp、Y195F、Y196F及Y195F/Y196F的表达、纯化 | 第19-20页 |
| 三、结果 | 第20-21页 |
| (一) Y195F蛋白Tyr196位点的突变 | 第20页 |
| (二) holo-Fbp、Y195F、Y196F及Y195F/Y196F的表达、纯化 | 第20-21页 |
| 四、讨论 | 第21页 |
| 五、结论 | 第21-23页 |
| 第三章 Fbp催化焦磷酸水解的机制研究 | 第23-32页 |
| 一、仪器与试剂 | 第23页 |
| (一) 仪器 | 第23页 |
| (二) 试剂 | 第23页 |
| 二、实验方法 | 第23-26页 |
| (一) 试剂准备 | 第23-24页 |
| (二) ~(31)P核磁共振磷谱 | 第24-25页 |
| (三) 数据处理 | 第25页 |
| (四) Dotblot实验 | 第25-26页 |
| 三、结果 | 第26-29页 |
| (一) Y195F、Y196F与PPi反应动力学 | 第26-29页 |
| (二) Dotblot实验 | 第29页 |
| 四、讨论 | 第29-31页 |
| 五、结论 | 第31-32页 |
| 第四章 Fbp突变体Y195F与Fe(NTA)结合反应研究 | 第32-38页 |
| 一、仪器与试剂 | 第32页 |
| (一) 仪器 | 第32页 |
| (二) 试剂 | 第32页 |
| 二、实验方法 | 第32-34页 |
| (一) 紫外吸收光谱 | 第32-33页 |
| (二) 数据处理 | 第33-34页 |
| 三、结果 | 第34-37页 |
| (一) Y195F和Fe(NTA)的反应时间测定 | 第34-35页 |
| (二) Y195F和Fe(NTA)的滴定反应 | 第35-37页 |
| 四、讨论 | 第37页 |
| 五、结论 | 第37-38页 |
| 第五章 铁调素Hepcidin的原核表达及纯化 | 第38-45页 |
| 一、仪器与试剂 | 第38-39页 |
| (一) 仪器 | 第38-39页 |
| (二) 试剂 | 第39页 |
| 二、实验方法 | 第39-40页 |
| (一) Hepcidin-25表达体系的构建 | 第39-40页 |
| (二) Mbp-hepcidin的表达及纯化 | 第40页 |
| 三、结果 | 第40-43页 |
| (一) MBP-hepcidin的诱导表达 | 第40-42页 |
| (二) 紫外吸收光谱 | 第42页 |
| (三) MBP-hepcidin酶切 | 第42-43页 |
| 四、讨论 | 第43-44页 |
| 五、结论 | 第44-45页 |
| 第六章 啤酒酵母MnSOD表达及纯化 | 第45-49页 |
| 一、仪器与试剂 | 第45-46页 |
| (一) 仪器 | 第45页 |
| (二) 试剂 | 第45-46页 |
| 二、实验方法 | 第46-47页 |
| (一) MBP-MnSOD质粒构建 | 第46页 |
| (二) MBP-MnSOD的融合表达 | 第46-47页 |
| 三、结果 | 第47-48页 |
| (一) MBP-MnSOD质粒的构建 | 第47页 |
| (二) MBP-MnSOD的融合表达 | 第47-48页 |
| 四、讨论 | 第48页 |
| 五、结论 | 第48-49页 |
| 附录 测序结果 | 第49-53页 |
| 参考文献 | 第53-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
