| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-26页 |
| 1 课题提出 | 第11页 |
| 2 耐盐相关的信号途径 | 第11-15页 |
| ·Ca~(2+)信号途径相关基因 | 第12-14页 |
| ·SOS信号途径相关基因 | 第12-13页 |
| ·钙依赖型蛋白激酶信号途径 | 第13-14页 |
| ·MAPK参与的信号传导途径相关基因 | 第14页 |
| ·ABA信号途径相关的基因 | 第14-15页 |
| ·其他信号传导途径相关的基因 | 第15页 |
| 3 离子调节相关的基因 | 第15-16页 |
| 4 渗透调节物质及相关蛋白的基因 | 第16-17页 |
| 5 氧化调节相关酶的基因 | 第17页 |
| 6 转录因子的结构特点及主要类别 | 第17-22页 |
| ·转录因子的结构特点 | 第17-18页 |
| ·植物主要的转录因子及特点 | 第18-22页 |
| ·MYB转录因子 | 第19页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第19页 |
| ·AP2/EREBP类转录因子 | 第19-20页 |
| ·锌指类转录因子 | 第20-21页 |
| ·NAC类转录因子 | 第21-22页 |
| 7 研究新基因功能的主要方法 | 第22-25页 |
| ·超表达技术 | 第22页 |
| ·RNAi和反义RNA | 第22-23页 |
| ·染色质免疫共沉淀技术(ChIP)及与芯片方法结合 | 第23-24页 |
| ·酵母双杂交 | 第24-25页 |
| 8 本课题的意义 | 第25-26页 |
| 材料与方法 | 第26-33页 |
| 1 实验材料 | 第26页 |
| ·菌株、质粒及试剂 | 第26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-33页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)引物 | 第26页 |
| ·基因克隆特异引物 | 第26-27页 |
| ·其他引物 | 第27页 |
| ·RACE扩增 | 第27-28页 |
| ·基因克隆、测序及分析 | 第28页 |
| ·超表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·RT-PCR | 第30-31页 |
| ·基因组织特异性表达分析 | 第31页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第31-32页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第32页 |
| ·目的基因在超表达转基因单株上的表达分析 | 第32页 |
| ·利用卡那霉素喷施法筛选T_1代分离植株 | 第32页 |
| ·T_1转基因植株分离的PCR检测 | 第32-33页 |
| 结果与分析 | 第33-53页 |
| 1 SlNAM1、SlNAC1、SlZF1、SlSRG1、SlSRG2的克隆与分析 | 第33-45页 |
| ·SlNAM1、SlNAC1、SlZF1、SlSRG1、SlSRG2的克隆 | 第33-35页 |
| ·番茄SlNAC1、SlNAMl的序列分析及二级结构预测 | 第35-40页 |
| ·番茄SlNAC1、SlNAM1的序列分析 | 第35-38页 |
| ·番茄SlNAC1、SlNAM1与其他植物相关基因的进化关系 | 第38-39页 |
| ·番茄SlNAC1、SlNAM1基因二级结构的预测分析 | 第39-40页 |
| ·番茄SlZF1基因序列分析及系统进化树绘制 | 第40-43页 |
| ·番茄SlZF1基因序列分析 | 第40-42页 |
| ·番茄SlZF1与其他植物相关基因的进化关系 | 第42-43页 |
| ·番茄SlSRG1和SlSRG2基因序列分析 | 第43-45页 |
| 2 植物载体的构建 | 第45-47页 |
| ·植物超表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第47页 |
| 3 转基因植株的获得 | 第47-50页 |
| ·再生植株的获得 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第48-50页 |
| 4 转基因植株的RT-PCR分析 | 第50-51页 |
| ·SlNAC1基因超表达转基因植株的RT-PCR分析 | 第50-51页 |
| ·SlNAM1基因超表达转基因植株的RT-PCR分析 | 第51页 |
| 5 T_1转基因植株的分离鉴定 | 第51-53页 |
| ·卡那霉素喷施法鉴定分离植株 | 第51页 |
| ·T1转基因植株的PCR检测 | 第51-53页 |
| 讨论 | 第53-56页 |
| 1 SlNAC1与SlNAM1的功能分析 | 第53页 |
| 2 SlZF1的功能分析 | 第53-54页 |
| 3 SlSRG1与SlSRG2的功能分析 | 第54页 |
| 4 T_0转基因植株表达分析 | 第54-55页 |
| 5 关于后期工作的设想 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附录一:植物DNA的小量法提取程序 | 第66-67页 |
| 附录二:质粒的小量提取方法 | 第67-68页 |
| 附录三:相关的载体图: | 第68-69页 |
| 附录四:TRIZOL一步法提取植物总RNA方法 | 第69-70页 |
| 附录五:相关基因登陆的信息 | 第70-74页 |
