| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 前言 | 第10页 |
| 一、蛋白酶简介 | 第10-11页 |
| 二、微生物来源的胞外蛋白酶的研究概况 | 第11-13页 |
| 三、胞外蛋白酶的功能 | 第13-14页 |
| 四、微生物金属蛋白酶 | 第14-19页 |
| ·微生物金属蛋白酶的来源和特点 | 第14-16页 |
| ·微生物来源金属蛋白酶的理化性质 | 第16-18页 |
| ·微生物金属蛋白酶的结构 | 第18-19页 |
| 五、微生物金属蛋白酶的基因克隆与表达 | 第19页 |
| 六、微生物金属蛋白酶的应用 | 第19-21页 |
| 参考文献 | 第21-26页 |
| 第二章 嗜线虫沙雷氏菌金属蛋白酶的分离纯化和理化性质的初步研究 | 第26-48页 |
| 一、材料与方法 | 第26-32页 |
| ·试验材料、试剂及仪器设备 | 第26-28页 |
| ·金属蛋白酶的分离纯化 | 第28-29页 |
| ·用观察蛋白酶水解圈法测定细菌胞外蛋白酶活力 | 第29页 |
| ·蛋白酶酶活力检测方法 | 第29-30页 |
| ·该酶的相对分子质量检测及纯度鉴定 | 第30页 |
| ·在不同培养基中的生长及蛋白酶活力的连续测定与比较 | 第30页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第30页 |
| ·理化因素对于酶活力的影响 | 第30-32页 |
| ·酶米氏常数的测定 | 第32页 |
| 二、结果与分析 | 第32-44页 |
| ·蛋白酶活力的确定 | 第32-33页 |
| ·分离纯化 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
| ·不同培养基中的生长及蛋白酶活力的连续测定与比较 | 第35-36页 |
| ·理化因素对于酶活力的影响 | 第36-44页 |
| ·米氏常数 | 第44页 |
| 三、讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 第三章 嗜线虫沙雷氏菌金属蛋白酶基因的克隆和序列分析 | 第48-59页 |
| 一、材料与方法 | 第48-50页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| 二、结果与分析 | 第50-56页 |
| ·N-末端氨基酸序列 | 第50页 |
| ·总DNA的提取 | 第50页 |
| ·金属蛋白酶成熟肽编码区的FCR扩增和克隆鉴定 | 第50-52页 |
| ·金属蛋白酶成熟肽编码区的序列分析 | 第52页 |
| ·金属蛋白酶成熟肽编码区的同源性分析 | 第52-53页 |
| ·金属蛋白酶成熟肽氨基酸序列同源性分析 | 第53-54页 |
| ·金属蛋白酶成熟肽的C-末端氨基酸序列的同源性分析 | 第54页 |
| ·金属蛋白酶成熟肽的Zn~(2+)配体和活性位点的同源性分析 | 第54-55页 |
| ·进化遗传学分析 | 第55-56页 |
| 三、讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 创新之处 | 第59-60页 |
| 发表文章 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62页 |
