| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| ·核盘菌与菌核病 | 第12-15页 |
| ·核盘菌的分类地位及生物学特性 | 第12页 |
| ·核盘菌所致菌核病的症状及危害 | 第12-13页 |
| ·核盘菌的致病机理 | 第13-15页 |
| ·菌核病的防治情况及研究意义 | 第15页 |
| ·植物抗病防御的病理生理 | 第15-20页 |
| ·过敏性反应(以下简称HR) | 第16页 |
| ·系统获得性抗性(system acquired resistance SAR) | 第16-17页 |
| ·植物的非宿主抗性——宿主与病原物的互作机制 | 第17-19页 |
| ·植物抗病反应的信号传导途径 | 第19-20页 |
| ·基因全长的克隆方法 | 第20-22页 |
| ·基因文库的筛选 | 第21页 |
| ·3'RACE or 5'RACE(rapid amplification of cDNA ends),即cDNA末端快速扩增法 | 第21页 |
| ·计算机杂交(computer hybridization) | 第21-22页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第22-28页 |
| ·基本原理 | 第22-23页 |
| ·优缺点 | 第23-24页 |
| ·酵母双杂交系统的进一步发展 | 第24-26页 |
| ·酵母双杂交系统的广泛应用 | 第26-27页 |
| ·MATCHMAKER GAL4 TWO-Hybrid System3简介 | 第27-28页 |
| ·绿色荧光蛋白标记 | 第28-31页 |
| ·绿色荧光蛋白研究现状 | 第28-29页 |
| ·绿色荧光蛋白的应用优点 | 第29页 |
| ·绿色荧光蛋白应用 | 第29-31页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-51页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株与质粒 | 第32页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第32-33页 |
| ·试验用的引物和寡核苷酸 | 第33-34页 |
| ·试验方法 | 第34-51页 |
| ·不同RNA的提取及纯化 | 第34-36页 |
| ·PG基因的克隆及诱饵载体PG-pGBKT7的构建 | 第36-38页 |
| ·油菜及小繁缕cDNA文库的构建和筛选 | 第38-45页 |
| ·5'RACE步骤 | 第45-46页 |
| ·与PG互作基因IPG-1全长的获得 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR及Real Time PCR | 第47-48页 |
| ·载体的构建 | 第48页 |
| ·酵母双杂交作用的进一步确认 | 第48页 |
| ·瞬时表达 | 第48-51页 |
| 第三章 结果与分析 | 第51-70页 |
| ·核盘菌PG基因的克隆及诱饵载体PG-pGBKT7的构建 | 第51-52页 |
| ·核盘菌PG基因的克隆 | 第51-52页 |
| ·诱饵载体PG-pGBKT7的构建 | 第52页 |
| ·油菜cDNA文库的构建及筛选 | 第52-57页 |
| ·核盘菌接种诱导后油菜总RNA的完整性 | 第52-53页 |
| ·油菜cDNA文库的构建 | 第53-54页 |
| ·油菜cDNA文库的质量 | 第54-57页 |
| ·IPG-1特征的研究 | 第57-61页 |
| ·IPG-1的序列分析 | 第57页 |
| ·IPG-1的半定量RT-PCR分析及Real TimePCR分析结果 | 第57-58页 |
| ·IPG-1的亚细胞定位结果 | 第58-59页 |
| ·IPG-1与PG酵母双杂交相互作用的进一步验证 | 第59-61页 |
| ·小繁缕cDNA文库的构建和筛选 | 第61-66页 |
| ·小繁缕总RNA的完整性 | 第61-62页 |
| ·经核盘菌诱导的小繁缕cDNA文库的构建 | 第62页 |
| ·诱饵PG对小繁缕cDNA文库的筛选得到阳性克隆(XEL-PG-1) | 第62-63页 |
| ·XFL-PG-1的特征研究 | 第63-66页 |
| ·载体的构建 | 第66-70页 |
| ·PAC-1基因的3'端序列的克隆及其RNAi载体的构建 | 第66-67页 |
| ·PG基因RNAi载体的构建 | 第67-68页 |
| ·IPG-1基因及其拟南芥同源基因AIPG的RNAi载体的构建 | 第68-69页 |
| ·IPG-1基因植物表达载体,原核表达载体的构建 | 第69-70页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第70-74页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·关于利用核盘菌毒性因子PG作为诱饵利用酵母双杂交筛选互作基因 | 第70-71页 |
| ·关于目的基因的特征研究 | 第71-72页 |
| ·关于表达载体的构建 | 第72页 |
| ·结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 附录:培养基、溶液的配制及载体图谱 | 第79-86页 |
| 攻读硕士学位期间已发表和待发表的论文 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
