中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
1 骨骼肌细胞的发生及其调控 | 第11-14页 |
2 骨骼肌细胞的退化、病变 | 第14-15页 |
3 骨骼肌细胞重建的细胞来源 | 第15-18页 |
·成肌细胞 | 第16页 |
·卫星细胞 | 第16页 |
·骨髓来源的干细胞 | 第16-17页 |
·其他肌源性前体细胞 | 第17-18页 |
·胚胎干细胞和原始生殖细胞 | 第18页 |
4 骨骼肌细胞的重建途径 | 第18-19页 |
5 骨骼肌细胞重建的分子机制 | 第19-21页 |
6 骨骼肌细胞诱导分化的研究现状 | 第21-22页 |
7 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 实验部分 | 第24-52页 |
实验一 构建细胞移植的动物模型 | 第24-31页 |
材料和方法 | 第24-27页 |
1 实验材料 | 第24-25页 |
·实验动物 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-27页 |
·小鼠肌肉损伤模型的建立 | 第25页 |
·DMD 免疫缺陷型小鼠模型的建立 | 第25-27页 |
·基因组 DNA 的提取 | 第25-26页 |
·PCR 反应 | 第26-27页 |
实验结果 | 第27-29页 |
1 小鼠肌肉损伤模型的建立 | 第27-28页 |
2 DMD 免疫缺陷型小鼠模型的建立 | 第28-29页 |
·Dystrophin 基因鉴定 | 第28页 |
·Scid 基因鉴定 | 第28-29页 |
讨论 | 第29-31页 |
实验二 人胚胎干细胞体内向骨骼肌细胞分化的诱导 | 第31-52页 |
材料和方法 | 第31-37页 |
1 实验材料 | 第31-33页 |
·细胞来源 | 第31页 |
·实验动物 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·细胞培养试剂 | 第31-32页 |
·免疫细胞化学试剂 | 第32页 |
·其他试剂 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-37页 |
·hES 细胞的体外扩增培养 | 第33-34页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的制备 | 第33-34页 |
·人 ES 细胞的体外培养 | 第34页 |
·hES 细胞的初步诱导 | 第34页 |
·照射剂量和移植时间的分析 | 第34-35页 |
·细胞移植 | 第35页 |
·细胞移植入 NOD-SCID 小鼠 | 第35页 |
·细胞移植入scid/mdx 小鼠 | 第35页 |
·组织标本的搜集和分析 | 第35页 |
·免疫组化 | 第35-36页 |
·地高辛标记的Alu DNA 探针原位杂交 | 第36页 |
·畸胎瘤试验 | 第36-37页 |
实验结果 | 第37-49页 |
1 hES 细胞的体外培养、EB 形成及诱导为骨骼肌前体样细胞的形态 | 第37-38页 |
2 不同照射剂量以及移植时间的结果分析 | 第38-40页 |
3 hES 来源的前体细胞在小鼠体内的诱导分化 | 第40-49页 |
·hES 来源的前体细胞在 NOD/SCID 小鼠体内的诱导分化 | 第40-46页 |
·卫星细胞的鉴定 | 第46-48页 |
·hES 细胞来源的前体细胞在scid/mdx 小鼠体内的诱导分化 | 第48-49页 |
·畸胎瘤分析 | 第49页 |
讨论 | 第49-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
实验试剂的配制 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |