中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-5页 |
英文缩略表 | 第5-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-21页 |
1 口蹄疫研究进展 | 第9-15页 |
·口蹄疫 | 第9页 |
·口蹄疫病原 | 第9-10页 |
·FMD的危害 | 第10页 |
·FMDV感染动物和免疫动物的区分 | 第10-11页 |
·口蹄疫的诊断与防制 | 第11-13页 |
·口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因及其功能 | 第13-15页 |
2 杆状病毒表达系统 | 第15-21页 |
·杆状病毒的特性 | 第15-17页 |
·杆状病毒表达系统的组成 | 第17-19页 |
·杆状病毒表达系统的优点 | 第19-21页 |
第二部分 研究报告 | 第21-58页 |
第一章 口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因在昆虫细胞中的分泌表达与重组蛋白的纯化 | 第21-47页 |
1 材料与方法 | 第22-39页 |
·菌株和质粒 | 第22-23页 |
·酶和试剂 | 第23页 |
·细胞和病毒 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·设计合成引物 | 第23-24页 |
·3ABC基因的获得 | 第24-25页 |
·克隆载体的构建 | 第25-29页 |
·重组穿梭载体的构建 | 第29-32页 |
·重组穿梭质粒序列测定 | 第32-33页 |
·重组杆状病毒的构建 | 第33-35页 |
·重组病毒滴度测定 | 第35-36页 |
·重组蛋白的表达 | 第36-37页 |
·重组蛋白的纯化 | 第37-39页 |
2 结果 | 第39-44页 |
·3ABC基因片段的PCR扩增 | 第39页 |
·重组克隆载体的鉴定 | 第39-40页 |
·重组穿梭载体的鉴定 | 第40-41页 |
·重组杆状病毒的筛选与鉴定 | 第41页 |
·重组杆状病毒噬斑分析 | 第41-42页 |
·重组杆状病毒MOI值和最佳表达时间的测定 | 第42-43页 |
·表达产物的纯化以及SDS-PAGE和Western blot检测 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
·杆状病毒表达系统 | 第44页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第44-45页 |
·重组蛋白分泌性表达条件 | 第45-46页 |
·重组蛋白的纯化 | 第46-47页 |
第二章 检测猪、羊口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体间接ELISA模型的建立 | 第47-58页 |
1 材料和方法 | 第47-51页 |
·抗原 | 第47-48页 |
·主要试剂和材料 | 第48页 |
·溶液的配制 | 第48页 |
·间接ELISA检测方法初步模型的建立 | 第48-50页 |
·反应活性测定 | 第50页 |
·特异性试验 | 第50页 |
·对比试验 | 第50页 |
·田间血清样品的检测 | 第50-51页 |
2 结果 | 第51-57页 |
·间接ELISA方法最佳工作条件的确定 | 第51-53页 |
·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第53页 |
·抗原反应活性测定 | 第53-54页 |
·ELISA特异性试验 | 第54-55页 |
·对比试验 | 第55-56页 |
·田间血清样品的检测 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
作者简介 | 第66-67页 |
导师简介 | 第67-68页 |