| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-32页 |
| ·m RNA 检测的重要性 | 第14-15页 |
| ·经典的m RNA 检测方法 | 第15-18页 |
| ·荧光标记核酸分子探针技术在mRNA 检测中的应用 | 第18-29页 |
| ·TaqMan 探针 | 第18-19页 |
| ·相邻探针 | 第19-20页 |
| ·QUAL 探针 | 第20-21页 |
| ·蝎形引物探针 | 第21页 |
| ·核酶探针 | 第21-22页 |
| ·分子信标 | 第22-29页 |
| ·m RNA 检测面临的挑战 | 第29页 |
| ·本文拟开展的研究工作 | 第29-32页 |
| 第2章 Reverse 分子信标用于mRNA 点突变的检测 | 第32-44页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·实验部分 | 第33-37页 |
| ·仪器和试剂 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·实验原理 | 第37-39页 |
| ·DNA 模板体外转录 | 第39页 |
| ·模板RNA 中点突变的检测 | 第39-41页 |
| ·细胞总RNA 中p53 m RNA 点突变的检测 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第3章 超猝灭分子信标的设计合成 | 第44-54页 |
| ·前言 | 第44-45页 |
| ·实验部分 | 第45-47页 |
| ·仪器和试剂 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-53页 |
| ·超猝灭分子信标的结构 | 第47-48页 |
| ·DNA、分子信标、超猝灭分子信标的合成纯化及质谱表征 | 第48-50页 |
| ·分子信标、超猝灭分子信标性能考察 | 第50-51页 |
| ·G/C 互换对超猝灭分子信标性能的影响 | 第51-52页 |
| ·Shared-stem 对超猝灭分子信标性能的影响 | 第52页 |
| ·末端延长对超猝灭分子信标性能的影响 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第4章 硫代修饰相邻探针用于细胞裂解液中mRNA 的检测 | 第54-70页 |
| ·前言 | 第54-55页 |
| ·实验部分 | 第55-60页 |
| ·仪器和试剂 | 第55-57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-69页 |
| ·实验原理 | 第60-61页 |
| ·硫代修饰探针性能的考察 | 第61-63页 |
| ·荧光供体及荧光受体分子间距离的优化 | 第63-64页 |
| ·不同探针及互补DNA 组合对DNase 1 的响应 | 第64-67页 |
| ·细胞裂解液中靶核酸的实时检测 | 第67-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 第5章 基于分子信标荧光增强速率检测活细胞内p21 m RNA 表达 | 第70-81页 |
| ·前言 | 第70-71页 |
| ·实验部分 | 第71-75页 |
| ·仪器和试剂 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-80页 |
| ·p21 MB 设计及性能考察 | 第75-76页 |
| ·细胞内p21 m RNA 表达的RT-PCR 检测 | 第76-77页 |
| ·鼻咽癌细胞p21 mRNA 表达的实时检测 | 第77-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 第6章 硫代修饰分子信标用于活细胞内m RNA 检测 | 第81-93页 |
| ·前言 | 第81页 |
| ·实验部分 | 第81-85页 |
| ·仪器和试剂 | 第81-83页 |
| ·实验方法 | 第83-85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-92页 |
| ·探针的设计 | 第85-87页 |
| ·探针的稳定性考察 | 第87-89页 |
| ·细胞外杂交混合物的细胞成像 | 第89-91页 |
| ·活细胞 mRNA 检测 | 第91-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 结论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-116页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
