| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-26页 |
| ·纤维素的结构及利用 | 第9-10页 |
| ·纤维素的结构 | 第9-10页 |
| ·纤维素酶的研究 | 第10-16页 |
| ·纤维素酶的组成及其功能 | 第10-12页 |
| ·纤维素酶的结构 | 第12页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第12-14页 |
| ·纤维素酶的来源 | 第14-15页 |
| ·反刍动物瘤胃中的纤维素酶 | 第15-16页 |
| ·未培养微生物的研究 | 第16-24页 |
| ·未培养微生物 | 第16页 |
| ·未培养微生物的研究方法 | 第16-19页 |
| ·未培养微生物宏基因组DNA的提取和纯化 | 第19页 |
| ·宏基因组文库 | 第19-24页 |
| ·本工作的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-44页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·样品的采集 | 第26页 |
| ·菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·菌种保存 | 第27-28页 |
| ·培养基、培养条件和抗生素 | 第28-29页 |
| ·常规溶液和缓冲液 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-44页 |
| ·质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·DNA的电泳、DNA片断大小和浓度的估算 | 第30页 |
| ·DNA的酶切及酶切产物的连接 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒的转化 | 第30-32页 |
| ·水牛瘤胃未培养微生物宏基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·宏基因组DNA的纯化 | 第33页 |
| ·宏基因组文库构建所需DNA片断的回收 | 第33-34页 |
| ·水牛瘤胃宏基因组文库的构建 | 第34-36页 |
| ·水牛瘤胃宏基因组文库中纤维素酶的筛选 | 第36-37页 |
| ·外源片段纤维素酶基因的定位 | 第37页 |
| ·纤维素酶基因的序列比对和分析 | 第37页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因umcel3G的表达 | 第37-38页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第38-40页 |
| ·重组蛋白Umcel3G的镍柱(Ni-NTA Agarose)纯化 | 第40-41页 |
| ·镍柱(Ni-NTA Agarose)纯化后Umcel3G的酶学特性研究 | 第41-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-58页 |
| ·水牛瘤胃未培养微生物宏基因组DNA的提取及纯化 | 第44-45页 |
| ·水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库的构建及文库质量检测 | 第45-46页 |
| ·水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库中表达表达纤维素酶活性克隆的筛选 | 第46-48页 |
| ·表达内切葡聚糖酶活性克隆的筛选 | 第46-47页 |
| ·可能表达外切葡聚糖酶活性克隆的筛选 | 第47页 |
| ·表达β-葡萄糖苷酶活性克隆的筛选 | 第47-48页 |
| ·pCGE04的亚克隆与序列分析 | 第48-49页 |
| ·pCGE06的亚克隆与序列分析 | 第49-51页 |
| ·其它仅表达4-MUC活性克隆的亚克隆及序列分析结果 | 第51-52页 |
| ·水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库β-葡萄糖苷酶基因Umcel3G的克隆和鉴定 | 第52-58页 |
| ·表达β-葡糖苷酶活性克隆pGLU64的筛选、亚克隆和序列分析 | 第52-55页 |
| ·umcel3G基因表达产物的表达和纯化 | 第55-56页 |
| ·重组Umcel3G的酶学特性 | 第56-57页 |
| ·部分金属离子对Umcel3G酶活的影响 | 第57-58页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第58-61页 |
| ·水牛瘤胃宏基因组DNA的提取及纯化 | 第58页 |
| ·水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库纤维素酶基因的克隆和鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组β-葡萄糖苷酶Umcel3G的潜在应用价值 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间所发表论文和取得的研究成果 | 第71页 |
