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大白猪OPN基因的克隆及其表达规律研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-25页
   ·研究背景第11页
   ·猪繁殖性状的QTL和候选基因的研究进展第11-14页
     ·基因组扫描法定位繁殖性状的QTL第11-12页
     ·候选基因法及繁殖性状候选基因第12-14页
   ·骨桥蛋白基因的研究进展第14-22页
     ·OPN基因的分子结构第15-16页
     ·OPN的基因结构及其表达调控第16-18页
     ·OPN的结构与功能的关系第18-19页
     ·OPN基因与生产性能的关系第19-22页
   ·RT-PCR定量技术第22-23页
     ·非竞争性RT-PCR技术第22-23页
     ·竞争性RT-PCR技术第23页
   ·蛋白印记技术(Western blot)第23-24页
   ·本研究的目的和意义第24-25页
2 材料与方法第25-36页
   ·实验材料第25-27页
     ·试验动物第25页
     ·组织样本采集第25页
     ·主要仪器设备第25页
     ·主要药品及试剂第25-27页
     ·工具酶及试剂盒第27页
   ·实验方法第27-36页
     ·总 RNA提取及检测第27-28页
     ·引物的设计与合成第28页
     ·反转录第28页
     ·OPN基因的克隆第28-31页
     ·半定量RT-PCR第31-32页
     ·Western Blot第32-34页
     ·猪子宫内膜上皮细胞的培养第34-36页
3 结果与分析第36-57页
   ·大白猪、野猪OPN基因的克隆、序列分析第36-42页
     ·猪OPN基因的克隆第36-37页
     ·猪OPN基因变异位点分析第37-38页
     ·OPN基因的结构、功能分析第38-40页
     ·OPN基因的分子进化分析第40-42页
   ·大白猪OPN基因的表达特性第42-54页
     ·半定量RT-PCR检测同一发育时期不同组织的表达情况第42-44页
     ·半定量RT-PCR检测同一组织不同时期的表达情况第44-51页
     ·大白猪和野家杂种猪OPN基因组织表达情况比较第51-54页
   ·大白猪OPN基因组织表达的Western blot检测第54-55页
   ·雌激素、孕激素对猪子宫内膜上皮细胞OPN基因表达影响的研究第55-57页
     ·添加雌激素和孕激素后细胞生长情况第55页
     ·PCR扩增循环参数的确定第55页
     ·添加不同浓度的雌激素和孕激素后OPN基因表达变化情况第55-57页
4 讨论第57-60页
   ·猪OPN基因的克隆第57页
   ·猪的OPN基因的组织表达特性分析第57-58页
     ·基因mRNA表达的测定第57-58页
     ·猪OPN基因的组织表达特性分析第58页
   ·猪OPN基因组织表达的Western blot分析第58-59页
   ·猪子宫内膜上皮细胞中添加雌激素和孕激素后OPN基因表达变化情况分析第59-60页
5 结论第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-67页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第67页

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