| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-25页 |
| 前言 | 第12页 |
| 1 蜜蜂白垩病流行病学研究进展 | 第12-15页 |
| ·病原 | 第12-13页 |
| ·传染源 | 第13页 |
| ·传播途径 | 第13-14页 |
| ·感染范围 | 第14页 |
| ·症状 | 第14-15页 |
| ·流行规律 | 第15页 |
| ·治疗方法 | 第15页 |
| 2 蜜蜂白垩病检测方法研究进展 | 第15-18页 |
| ·常规生化检测方法 | 第15-16页 |
| ·电子显微镜检测方法 | 第16-17页 |
| ·PCR方法 | 第17-18页 |
| 3 荧光实时定量PCR技术 | 第18-24页 |
| ·定量PCR反应动力学研究进展 | 第18-19页 |
| ·荧光实时定量PCR检测原理 | 第19-22页 |
| ·ABI 7000荧光实时定量PCR检测仪检测理论 | 第22-23页 |
| ·TaqMan探针的设计原则 | 第23-24页 |
| ·目前存在的问题及展望 | 第24页 |
| 4 本研究的背景、目的和意义 | 第24-25页 |
| 实验内容 | 第25-55页 |
| 试验一 蜜蜂白垩病PCR检测方法的建立 | 第25-39页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| ·病料和菌种 | 第25页 |
| ·试剂及培养基 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| ·蜜蜂球囊菌的分离培养 | 第26页 |
| ·PCR方法 | 第26-30页 |
| 3 结果 | 第30-36页 |
| ·PCR方法的建立与标化 | 第30-34页 |
| ·PCR的特异性检测结果 | 第34-35页 |
| ·PCR的敏感性检测 | 第35页 |
| ·重复性试验 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| ·关于本试验的研究背景、目的和意义 | 第36-37页 |
| ·关于PCR | 第37页 |
| ·关于PCR的引物 | 第37页 |
| ·关于病原培养应注意的问题 | 第37-38页 |
| ·关于PCR检测技术中模板DNA的提取与保存 | 第38页 |
| ·关于试验过程中DNA模板污染的问题 | 第38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 试验二 蜜蜂白垩病实时定量荧光PCR检测方法的建立 | 第39-54页 |
| 1 材料与方法 | 第39-44页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40页 |
| ·荧光实时定量PCR方法 | 第40-44页 |
| 2 结果 | 第44-51页 |
| ·荧光PCR方法的建立与标化 | 第44-48页 |
| ·实时荧光PCR敏感性实验结果 | 第48-49页 |
| ·实时荧光PCR特异性实验结果 | 第49页 |
| ·实时荧光PCR重复性实验结果 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| ·关于本试验的目的和意义 | 第51页 |
| ·关于实时定量荧光PCR | 第51-52页 |
| ·关于荧光PCR的引物、探针 | 第52页 |
| ·关于荧光定量PCR操作过程中应注意的问题 | 第52页 |
| ·关于本研究未应用于临床的原因以及该技术应用于实践的可行性 | 第52-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 个人简介 | 第60页 |
