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甜瓜酸性转化酶基因表达特性分析及功能鉴定

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
英文缩略词第10-11页
1 引言第11-23页
   ·甜瓜果实糖分积累特点第11-12页
   ·甜瓜蔗糖代谢相关酶在蔗糖代谢中的作用第12-14页
   ·转化酶的研究第14-17页
     ·转化酶的分类及生理、生化特性第14-15页
     ·转化酶基因及表达第15-17页
     ·转化酶基因转化植株第17页
   ·反义技术的研究第17-21页
     ·反义技术的概念及作用原理第17-19页
     ·反义核酸技术在植物基因工程中的应用第19-21页
   ·子房注射第21页
   ·本研究的目的与意义第21-23页
2 试验材料与方法第23-36页
   ·试验材料及试剂第23页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·试剂第23页
   ·试验方法第23-36页
     ·碱法大量提取质粒 DNA第23-24页
     ·子房注射法转化甜瓜第24-25页
     ·PCR 法筛选转基因阳性植株第25-26页
       ·CTAB 微量法提取基因组 DNA第25页
       ·PCR 鉴定阳性植株第25-26页
     ·Southern Blots 鉴定转基因植株第26-29页
       ·基因组 DNA 的提取及限制性内切酶消化第26页
       ·地高辛标记DNA 探针第26-28页
       ·电泳、转膜和固定第28页
       ·预杂交、杂交和免疫检测第28-29页
     ·转基因植株生长势及果实性状统计第29页
     ·PCR 和PCR-Southern 鉴定T1代转基因植株第29-30页
       ·PCR 鉴定 T1代转基因植株第29-30页
       ·PCR-Southern 鉴定T1代转基因植株第30页
     ·转基因植株生长势指标的测定第30页
       ·T_1代转基因植株果实膨大期功能叶光合速率日变化和生育期日均光合速率的测定第30页
       ·T_1代转基因植株叶片叶绿素含量及叶绿体超微结构的测定第30页
     ·T_1代转基因甜瓜果实发育动态及各时期各单糖含量和转化酶活性的测定第30-32页
       ·T_1代转基因甜瓜果实发育期各单糖含量测定第31页
       ·T_1 转基因甜瓜果实发育期转化酶活性的测定第31-32页
     ·AI基因时空表达特性分析第32-36页
       ·异硫氰酸胍-酸性酚-氯仿抽提法提取甜瓜果实 RNA第32-33页
       ·地高辛标记 RNA 探针第33-34页
       ·RNA 电泳分离、转膜和固定第34页
       ·预杂交、杂交和免疫检测第34-36页
3 结果与分析第36-49页
   ·转基因植株的鉴定第36-37页
     ·PCR鉴定转基因植株第36页
     ·Southern Blots 鉴定转基因植株第36-37页
     ·子房注射法转化效率第37页
   ·T_O代转基因植株生长势及单果质量和果实可溶性固形物含量第37-38页
   ·T_O代转基因甜瓜果实单果质量和可溶性固形物含量第38页
   ·PCR 和 PCR-Southern Blot 鉴定T_1代转基因植株第38-39页
   ·T_1代转基因植株生长势、光合速率、激素和色素含量的测定第39-44页
     ·T_1代转基因植株生长势测定第39-40页
     ·T_1 转基因植株光合速率的测定第40-41页
     ·T_1 转基因植株色素和内源激素含量的测定第41页
     ·T_1 转基因植株叶片细胞和叶绿体超微结构的测定第41-44页
   ·T_1代转基因成熟甜瓜单瓜质量和可溶性糖含量等指标第44页
   ·T_1代转基因甜瓜果实生长动态第44-45页
   ·T_1 转基因甜瓜果实发育期各单糖含量和转化酶活性分析第45-47页
     ·T_1代转基因甜瓜果实发育期各单糖含量变化第45-46页
     ·T_1代转基因甜瓜果实发育期转化酶活性变化第46-47页
   ·AI 基因时空表达特性分析第47-49页
     ·AI基因在果实发育期间的表达特性分析第47页
     ·AI基因的组织表达特性分析第47-49页
4 讨论第49-53页
   ·子房注射法在甜瓜转基因上的应用第49页
   ·PCR法在鉴定转基因植株中的应用第49页
   ·Anti-MAI1对转基因植株生长势的影响第49-50页
   ·Anti-MAI1基因对果实糖含量和酸性转化酶活性的影响第50-51页
   ·AI 基因表达情况研究第51-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
攻读硕士期间发表论文第62页

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