| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-30页 |
| ·环境胁迫与信号转导 | 第16-17页 |
| ·细胞信号转导系统 | 第16-17页 |
| ·蛋白质可逆磷酸化 | 第17页 |
| ·蛋白激酶与蛋白质磷酸化 | 第17-18页 |
| ·植物中MAPKs | 第18-28页 |
| ·植物中MAPKs 的结构特点 | 第19页 |
| ·植物中MAPKs 的种类 | 第19-20页 |
| ·植物中MAPKs 级联途径(MAPK cascade) | 第20-21页 |
| ·MAPKs 在植物胁迫信号转导中的作用 | 第21-26页 |
| ·MAPKs 级联途径的特异性 | 第26-28页 |
| ·MAPKs 级联途径研究的展望 | 第28页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-53页 |
| ·实验材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第30页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·酶及生化试剂 | 第30-31页 |
| ·PCR 引物 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-43页 |
| ·植物材料总RNA 的提取及甲醛变性胶电泳 | 第32-34页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第34页 |
| ·半定量RT-PCR | 第34-35页 |
| ·原核表达玉米ZmOSMAPK1 蛋白 | 第35-43页 |
| ·ZmOSMAPK1 基因转化烟草正义表达载体的构建 | 第43-47页 |
| ·表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第46-47页 |
| ·拟南芥的转化、转基因植株鉴定及分析 | 第47-49页 |
| ·拟南芥的转化 | 第47-48页 |
| ·转基因植株筛选 | 第48-49页 |
| ·转基因植株的检测 | 第49-50页 |
| ·转基因植株的PCR 筛选 | 第49-50页 |
| ·Western blot 检测转基因植株目的蛋白表达水平 | 第50页 |
| ·玉米根系cDNA 文库构建 | 第50-52页 |
| ·Total RNA 的提取及质量鉴定 | 第50页 |
| ·mRNA 的提取及质量鉴定 | 第50页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第50-51页 |
| ·cDNA 文库质量鉴定 | 第51-52页 |
| ·部分放大的cDNA 文库制作 | 第52页 |
| ·本研究使用的软件 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-77页 |
| ·不同逆境处理和信号物质作用下玉米根系MAPK 基因的表达规律 | 第53-65页 |
| ·玉米MAPKs 基因聚类分析 | 第53-54页 |
| ·玉米根系MAPKs 表达对干旱、高盐及低温胁迫的响应 | 第54-63页 |
| ·植物激素对玉米根系MAPKs 表达的调控 | 第63-64页 |
| ·机械损伤及紫外线照射对玉米根系MAPKs 表达的影响 | 第64-65页 |
| ·钙离子与玉米根系MAPKs 信号转导的关系 | 第65页 |
| ·ZmOSMAPK1 在大肠杆菌种的表达、抗体制备及效价测定 | 第65-69页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第65-66页 |
| ·重组蛋白表达与SDS-PAGE 分析 | 第66-68页 |
| ·pET30a- ZmOSMAPK1 重组蛋白亲和纯化及抗血清效价测定 | 第68页 |
| ·可溶性 ZmOSMAPK1 重组蛋白的鉴定 | 第68-69页 |
| ·ZmOSMAPK1 重组蛋白在植物中的表达 | 第69页 |
| ·ZmOSMAPK1 在拟南芥中过表达及转基因拟南芥对逆境刺激的响应 | 第69-73页 |
| ·转基因拟南芥表达载体P81121- ZmOSMAPK1 的构建和鉴定 | 第70-71页 |
| ·转基因拟南芥耐旱、耐盐性的分析 | 第71-73页 |
| ·ZmOSMAPK1 基因在烟草中超表达对烟草抗性的影响 | 第73-74页 |
| ·转基因烟草表达载体P81121- Zm OSMAPK1 的构建和鉴定 | 第73-74页 |
| ·转ZmOSMAPK1 基因烟草耐冷性分析 | 第74页 |
| ·cDNA 文库构建 | 第74-77页 |
| ·cDNA 文库的意义 | 第74-75页 |
| ·cDNA 文库质量鉴定 | 第75-76页 |
| ·cDNA 文库的初步筛选 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-81页 |
| ·玉米根系中MAPKs 及其同源基因的聚类分析 | 第77页 |
| ·干旱、高盐及低温胁迫对玉米根系MAPKs 表达的影响 | 第77-78页 |
| ·玉米MAPKs 表达模式与植物激素、信号物质的关系 | 第78页 |
| ·机械损伤及紫外线照射对玉米根系MAPKs 表达的影响 | 第78-80页 |
| ·不同逆境处理和信号物质作用下ZmOSMAPK1 蛋白的表达 | 第80页 |
| ·转基因植株的抗性分析 | 第80页 |
| ·cDNA 文库的构建及展望 | 第80-81页 |
| 5 结论 | 第81-82页 |
| 6 下一步研究设想 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-96页 |
| 附录 | 第96-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第100页 |
