中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献研究综述 | 第9-27页 |
引言 | 第9页 |
·木霉菌的研究现状 | 第9-14页 |
·形态学特征 | 第10页 |
·生态学特性 | 第10-11页 |
·木霉菌的生防机制 | 第11-14页 |
·丝状真菌的转化方法 | 第14-19页 |
·CaCl_2\PEG 介导的原生质体转化 | 第15-16页 |
·电激转化法 | 第16页 |
·醋酸锂转化 | 第16-17页 |
·共转化 | 第17页 |
·基因枪法 | 第17页 |
·限制酶介导的转化(Restriction enzyme-mediated integration REMI) | 第17-18页 |
·选择性标记 | 第18-19页 |
·土壤杆菌介导(AGROBACTERIUM TUMEFACIENS-MEDIATED TRANSFORMATION,ATMT)的丝状真菌遗传转化 | 第19-24页 |
·ATMT 转化方法的原理 | 第20-21页 |
·ATMT 法转化特点 | 第21-22页 |
·影响ATMT 介导真菌转化效率的因素 | 第22-24页 |
·ATMT 法在木霉转化中的应用 | 第24-25页 |
·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
·目的与意义 | 第25-26页 |
·技术路线 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-39页 |
·实验菌株、质粒与培养条件 | 第27-28页 |
·培养基的配制 | 第28页 |
·试剂和缓冲液 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-36页 |
·绿色木霉LTR-2 对潮霉素浓度梯度敏感实验 | 第29页 |
·绿色木霉LTR-2 分生孢子悬浮液的制备 | 第29-30页 |
·碱裂解法提取大肠杆菌中的质粒 | 第30-31页 |
·农杆菌的冻融法转化 | 第31页 |
·T-DNA 对绿色木霉的转化及转化条件的优化 | 第31-32页 |
·疑似突变体基因组DNA 的提取 | 第32-33页 |
·疑似突变体基因组DNA 分子鉴定 | 第33-36页 |
·绿色木霉LTR-2 突变体的表型分析 | 第36-37页 |
·潮霉素抗性的遗传稳定性检测 | 第36页 |
·菌落形态与生长速度检测 | 第36-37页 |
·疑似突变体的防病性能实验 | 第37-39页 |
·平板对峙实验 | 第37页 |
·小麦纹枯病盆栽生防实验 | 第37-39页 |
第三章 结果与分析 | 第39-56页 |
·绿色木霉LTR-2 对潮霉素浓度梯度敏感实验 | 第39页 |
·大肠杆菌和农杆菌中PCAMBIA1300 质粒的提取和双酶切电泳 | 第39-40页 |
·农杆菌对绿色木霉 LTR-2 的转化 | 第40-43页 |
·乙酰丁香酮(AS)对转化效率的影响 | 第41页 |
·木霉分生孢子浓度对转化效率的影响 | 第41-42页 |
·共培养时间对转化效率的影响 | 第42-43页 |
·绿色木霉LTR-2 突变体的分子鉴定 | 第43-44页 |
·PCR 鉴定结果 | 第43页 |
·Southern 杂交鉴定结果 | 第43-44页 |
·突变体的表型分析 | 第44-45页 |
·突变体的遗传稳定性 | 第44-45页 |
·突变体表型特征 | 第45页 |
·绿色木霉LTR-2 突变体的病害防治性能实验 | 第45-56页 |
·平板对峙实验 | 第45-52页 |
·盆栽实验小麦纹枯病防治结果 | 第52-54页 |
·木霉及其突变子抑菌能力和重寄生能力与生物防治效果的关系 | 第54-56页 |
第四章 讨论 | 第56-59页 |
·ATMT 法转化绿色木霉的意义 | 第56页 |
·转化的条件 | 第56-57页 |
·质粒的构建与转化 | 第57页 |
·突变体分子分析及基因克隆 | 第57-58页 |
·ATMT 插入突变对木霉性状的影响 | 第58页 |
·木霉抑菌能力、重寄生能力与盆栽效果之间相互关系 | 第58-59页 |
第五章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66页 |