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土壤杆菌介导的绿色木霉插入突变及重复寄生与生物防治能力的关系

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献研究综述第9-27页
 引言第9页
   ·木霉菌的研究现状第9-14页
     ·形态学特征第10页
     ·生态学特性第10-11页
     ·木霉菌的生防机制第11-14页
   ·丝状真菌的转化方法第14-19页
     ·CaCl_2\PEG 介导的原生质体转化第15-16页
     ·电激转化法第16页
     ·醋酸锂转化第16-17页
     ·共转化第17页
     ·基因枪法第17页
     ·限制酶介导的转化(Restriction enzyme-mediated integration REMI)第17-18页
     ·选择性标记第18-19页
   ·土壤杆菌介导(AGROBACTERIUM TUMEFACIENS-MEDIATED TRANSFORMATION,ATMT)的丝状真菌遗传转化第19-24页
     ·ATMT 转化方法的原理第20-21页
     ·ATMT 法转化特点第21-22页
     ·影响ATMT 介导真菌转化效率的因素第22-24页
   ·ATMT 法在木霉转化中的应用第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-27页
     ·目的与意义第25-26页
     ·技术路线第26-27页
第二章 材料与方法第27-39页
   ·实验菌株、质粒与培养条件第27-28页
   ·培养基的配制第28页
   ·试剂和缓冲液第28-29页
   ·实验方法第29-36页
     ·绿色木霉LTR-2 对潮霉素浓度梯度敏感实验第29页
     ·绿色木霉LTR-2 分生孢子悬浮液的制备第29-30页
     ·碱裂解法提取大肠杆菌中的质粒第30-31页
     ·农杆菌的冻融法转化第31页
     ·T-DNA 对绿色木霉的转化及转化条件的优化第31-32页
     ·疑似突变体基因组DNA 的提取第32-33页
     ·疑似突变体基因组DNA 分子鉴定第33-36页
   ·绿色木霉LTR-2 突变体的表型分析第36-37页
     ·潮霉素抗性的遗传稳定性检测第36页
     ·菌落形态与生长速度检测第36-37页
   ·疑似突变体的防病性能实验第37-39页
     ·平板对峙实验第37页
     ·小麦纹枯病盆栽生防实验第37-39页
第三章 结果与分析第39-56页
   ·绿色木霉LTR-2 对潮霉素浓度梯度敏感实验第39页
   ·大肠杆菌和农杆菌中PCAMBIA1300 质粒的提取和双酶切电泳第39-40页
   ·农杆菌对绿色木霉 LTR-2 的转化第40-43页
     ·乙酰丁香酮(AS)对转化效率的影响第41页
     ·木霉分生孢子浓度对转化效率的影响第41-42页
     ·共培养时间对转化效率的影响第42-43页
   ·绿色木霉LTR-2 突变体的分子鉴定第43-44页
     ·PCR 鉴定结果第43页
     ·Southern 杂交鉴定结果第43-44页
   ·突变体的表型分析第44-45页
     ·突变体的遗传稳定性第44-45页
     ·突变体表型特征第45页
   ·绿色木霉LTR-2 突变体的病害防治性能实验第45-56页
     ·平板对峙实验第45-52页
     ·盆栽实验小麦纹枯病防治结果第52-54页
     ·木霉及其突变子抑菌能力和重寄生能力与生物防治效果的关系第54-56页
第四章 讨论第56-59页
   ·ATMT 法转化绿色木霉的意义第56页
   ·转化的条件第56-57页
   ·质粒的构建与转化第57页
   ·突变体分子分析及基因克隆第57-58页
   ·ATMT 插入突变对木霉性状的影响第58页
   ·木霉抑菌能力、重寄生能力与盆栽效果之间相互关系第58-59页
第五章 结论第59-60页
参考文献第60-66页
致谢第66页

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