缩略语表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-12页 |
前言 | 第12-13页 |
文献回顾 | 第13-36页 |
第一部分:原发性肝癌的研究现状及其治疗方法 | 第13-22页 |
第二部分:多种肿瘤标志物在原发性肝癌中的诊断 | 第22-33页 |
第三部分:LIN-288基因的研究现状 | 第33-36页 |
正文 | 第36-80页 |
第一部分 人LIN-288基因的克隆、表达及抗体制备 | 第36-50页 |
1. 实验材料和主要仪器 | 第37-38页 |
2. 实验方法 | 第38-44页 |
·细胞培养及低氧刺激 | 第38页 |
·LIN-288基因的扩增 | 第38-40页 |
·原核表达载体pRSET-A-LIN288的构建 | 第40-41页 |
·融合蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第41-42页 |
·LIN-188蛋白的亲和纯化 | 第42页 |
·兔抗人LIN-188抗血清的制备 | 第42页 |
·多克隆抗血清效价的检测 | 第42-43页 |
·抗体的纯化 | 第43页 |
·纯化抗体的蛋白印迹验证 | 第43-44页 |
3. 实验结果 | 第44-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
第二部分 LIN-28B在原发性肝癌组织中的表达分析 | 第50-64页 |
1. 实验材料和主要仪器 | 第51-52页 |
2. 实验方法 | 第52-55页 |
·Real time PCR引物的设计合成 | 第52-53页 |
·Real time PCR | 第53-54页 |
·细胞培养 | 第54页 |
·Western Blot | 第54-55页 |
3. 实验结果 | 第55-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
第三部分 LIN-288在原发性肝癌的发展过程中功能的初步研究 | 第64-80页 |
1. 实验材料和主要仪器 | 第65-67页 |
2. 实验方法 | 第67-70页 |
·真核表达载体的构建 | 第67页 |
·干涉载体的构建 | 第67-68页 |
·细胞培养及瞬时转染 | 第68-69页 |
·Western Blot | 第69页 |
·细胞的稳定转染 | 第69页 |
·MTT法测定细胞生长 | 第69页 |
·流式细胞仪检测细胞周期变化 | 第69-70页 |
3. 实验结果 | 第70-77页 |
4. 讨论 | 第77-80页 |
小结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-93页 |
个人简历和发表论著 | 第93-95页 |
致谢 | 第95页 |