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Split-ubiquitin膜蛋白酵母双杂交系统的构建及其应用

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
前言第8-14页
材料和方法第14-45页
 1.材料第14-24页
 2.方法第24-45页
结果第45-75页
 一 基于断裂泛素(split-ubiquitin)的膜蛋白酵母双杂交系统的构建第45-58页
  1、酵母菌种、报告基因和重组转录因子的选择第45-46页
  2、构建阳性对照质粒第46页
  3、构建pBait质粒第46-47页
  4、构建pPrey质粒第47-49页
  5、UBPs酶切活性、TF的转录激活活性和报告基因表达情况的检测第49-51页
  6、用LASS2和VPL对系统进行验证第51-54页
  7、反向膜蛋白酵母双杂交系统的构建第54-56页
  8、第一部分小结第56-58页
 二 split-ubiquitin膜蛋白酵母双杂交系统的应用之一:线粒体膜蛋白BNIP3引起的细胞凋亡途径的研究第58-68页
  1、构建split-ubiqutin膜蛋白酵母双杂交筛选文库—人肝cDNA文库第58-59页
  2、线粒体膜蛋白BNIP3相互作用蛋白的筛选鉴定第59-60页
  3、验证线粒体膜蛋白BNIP3和ACAA2的相互作用第60-63页
  4、BNIP3和ACAA2的共定位在线粒体第63-64页
  5、ACAA2抑制了BNIP3诱导的凋亡第64-66页
  6、ACAA2减弱了BNIP3引发的线粒体功能破坏第66页
  7、第二部分小结第66-68页
 三 split-ubiquitin膜蛋白酵母双杂交系统的应用之二:结核杆菌致病机制的初步研究第68-75页
  1、结核杆菌编码蛋白TPP、Wag31和CFP-10在split-ubiquitin系统中的自激活检测第68-69页
  2、构建split-ubiqutin膜蛋白酵母双杂交筛选文库—人巨噬细胞cDNA文库第69页
  3、筛选与结核杆菌蛋白Wag31相互作用的蛋白第69-70页
  4、体内外验证结核杆菌蛋白Wag31与XCL2之间的相互作用第70-72页
  5、结核杆菌蛋白Wag31激活了XCL2而不是XCL1在巨噬细胞的表达第72-74页
  6、第三部分小结第74-75页
讨论第75-80页
参考文献第80-86页
综述第86-98页
相关文章第98页
资助情况第98-99页
致谢第99-100页

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