中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-14页 |
材料和方法 | 第14-45页 |
1.材料 | 第14-24页 |
2.方法 | 第24-45页 |
结果 | 第45-75页 |
一 基于断裂泛素(split-ubiquitin)的膜蛋白酵母双杂交系统的构建 | 第45-58页 |
1、酵母菌种、报告基因和重组转录因子的选择 | 第45-46页 |
2、构建阳性对照质粒 | 第46页 |
3、构建pBait质粒 | 第46-47页 |
4、构建pPrey质粒 | 第47-49页 |
5、UBPs酶切活性、TF的转录激活活性和报告基因表达情况的检测 | 第49-51页 |
6、用LASS2和VPL对系统进行验证 | 第51-54页 |
7、反向膜蛋白酵母双杂交系统的构建 | 第54-56页 |
8、第一部分小结 | 第56-58页 |
二 split-ubiquitin膜蛋白酵母双杂交系统的应用之一:线粒体膜蛋白BNIP3引起的细胞凋亡途径的研究 | 第58-68页 |
1、构建split-ubiqutin膜蛋白酵母双杂交筛选文库—人肝cDNA文库 | 第58-59页 |
2、线粒体膜蛋白BNIP3相互作用蛋白的筛选鉴定 | 第59-60页 |
3、验证线粒体膜蛋白BNIP3和ACAA2的相互作用 | 第60-63页 |
4、BNIP3和ACAA2的共定位在线粒体 | 第63-64页 |
5、ACAA2抑制了BNIP3诱导的凋亡 | 第64-66页 |
6、ACAA2减弱了BNIP3引发的线粒体功能破坏 | 第66页 |
7、第二部分小结 | 第66-68页 |
三 split-ubiquitin膜蛋白酵母双杂交系统的应用之二:结核杆菌致病机制的初步研究 | 第68-75页 |
1、结核杆菌编码蛋白TPP、Wag31和CFP-10在split-ubiquitin系统中的自激活检测 | 第68-69页 |
2、构建split-ubiqutin膜蛋白酵母双杂交筛选文库—人巨噬细胞cDNA文库 | 第69页 |
3、筛选与结核杆菌蛋白Wag31相互作用的蛋白 | 第69-70页 |
4、体内外验证结核杆菌蛋白Wag31与XCL2之间的相互作用 | 第70-72页 |
5、结核杆菌蛋白Wag31激活了XCL2而不是XCL1在巨噬细胞的表达 | 第72-74页 |
6、第三部分小结 | 第74-75页 |
讨论 | 第75-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
综述 | 第86-98页 |
相关文章 | 第98页 |
资助情况 | 第98-99页 |
致谢 | 第99-100页 |