| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| ·植物细胞中的Ca~(2+)信号及其传递 | 第12-13页 |
| ·植物细胞中的钙 | 第12页 |
| ·Ca~(2+)信号的产生与传递 | 第12-13页 |
| ·CBLs 在植物中广泛存在 | 第13-14页 |
| ·CBLs 的结构特征 | 第13-14页 |
| ·CBLs 的靶蛋白 | 第14页 |
| ·CBLs 基因的功能 | 第14-17页 |
| ·参与盐胁迫信号途径 | 第14-16页 |
| ·参与干旱、低温胁迫信号途径 | 第16页 |
| ·参与低K~+胁迫信号途径 | 第16页 |
| ·参与ABA 等信号途径 | 第16页 |
| ·玉米CBLs | 第16-17页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR) | 第17-19页 |
| ·RT-qPCR 的原理 | 第17-18页 |
| ·RT-qPCR 的常见方法 | 第18页 |
| ·RT-qPCR 的应用 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19页 |
| 2 RT-qPCR | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·植物材料及处理 | 第19页 |
| ·酶及试剂 | 第19页 |
| ·溶液的配制 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-23页 |
| ·总RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·RNA 的纯化 | 第21页 |
| ·cDNA 的合成 | 第21-22页 |
| ·RT-qPCR | 第22-23页 |
| ·数据分析 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-35页 |
| ·总RNA 的提取与检测 | 第23-24页 |
| ·ZmCBLs 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第24-35页 |
| ·ZmCBL1 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第24-26页 |
| ·ZmCBL2-1 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第26-28页 |
| ·ZmCBL2-2 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第28-30页 |
| ·ZmCBL6 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第30-31页 |
| ·ZmCBL8 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第31-33页 |
| ·ZmCBL10 在不同胁迫条件下的表达动态 | 第33-35页 |
| 3 ZmCBL2-1 基因的克隆与功能研究 | 第35-50页 |
| ·实验材料与方法 | 第35-42页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·植物材料与载体 | 第35页 |
| ·酶及试剂 | 第35页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-42页 |
| ·总RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·RNA 的纯化 | 第36页 |
| ·cDNA 的合成 | 第36页 |
| ·基因克隆与测序 | 第36-38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| ·表达载体构建 | 第38-39页 |
| ·转化拟南芥 | 第39-41页 |
| ·转基因植株的筛选与繁殖 | 第41页 |
| ·转基因植株基因组DNA 的提取(SDS 法) | 第41页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第41-42页 |
| ·转基因株系的RT-PCR 检测 | 第42页 |
| ·转基因株系的表型鉴定 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-50页 |
| ·基因克隆与序列分析 | 第42-45页 |
| ·总RNA 的提取与检测 | 第42-43页 |
| ·基因克隆 | 第43页 |
| ·序列分析 | 第43-45页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·转基因拟南芥的获得与分子检测 | 第46-50页 |
| ·转化农杆菌及抗性植株筛选 | 第46-47页 |
| ·T_1 代阳性植株的PCR 检测 | 第47-48页 |
| ·转基因拟南芥的RT-PCR 分析 | 第48页 |
| ·转基因株系的表型鉴定 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| ·RT-qPCR 的敏感性与可靠性 | 第50页 |
| ·ZmCBLs 参与对多种逆境胁迫的应答反应 | 第50-51页 |
| ·ZmCBLs 的生物学功能 | 第51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |