哺乳动物粪便DNA提取技术研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| 1 非损伤性取样的种类 | 第14-15页 |
| 2 粪便样品的优点 | 第15页 |
| 3 粪便DNA分析的理论依据及可靠性 | 第15-16页 |
| 4 粪便DNA分子标记 | 第16-17页 |
| 5 粪便DNA提取技术进展 | 第17-22页 |
| 6 粪便DNA在濒危动物保护中的应用 | 第22-24页 |
| 7 本论文立论背景 | 第24-27页 |
| 第二章 高纯度粪便DNA提取通用方案的建立 | 第27-54页 |
| 1 材料和方法 | 第27-37页 |
| ·样品的采集与保存 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·取样与预处理 | 第28页 |
| ·DNA提取 | 第28-30页 |
| ·PCR扩增 | 第30-34页 |
| ·纯度验证 | 第34-36页 |
| ·通用性检测 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-50页 |
| ·提取、扩增结果 | 第37-38页 |
| ·PCR体系优化结果 | 第38-42页 |
| ·PCR增强剂的选择和优化结果 | 第42-43页 |
| ·降落PCR的效果 | 第43-46页 |
| ·纯度验证 | 第46-48页 |
| ·通用性检测 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-54页 |
| ·改进型CTAB法提取粪便DNA | 第50页 |
| ·方法核心技术 | 第50-51页 |
| ·影响PCR反应的因素及解决方法 | 第51-52页 |
| ·假阳性 | 第52-53页 |
| ·提取方法的通用性 | 第53-54页 |
| 第三章 陈旧粪便DNA提取方法体系的建立 | 第54-64页 |
| 1 材料和方法 | 第54-58页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54-55页 |
| ·DNA提取 | 第55-56页 |
| ·与其他方法的比较 | 第56-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| ·3年期样品DNA提取及PCR扩增 | 第58-59页 |
| ·4.5年期样品DNA提取及PCR扩增 | 第59页 |
| ·测序 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| ·陈旧粪便DNA提取的困难 | 第61-62页 |
| ·陈旧粪便DNA提取的关键技术 | 第62-63页 |
| ·结论 | 第63-64页 |
| 第四章 对粪便保存方法的研究 | 第64-77页 |
| 1 材料和方法 | 第64-68页 |
| ·粪便中遗传信息的最佳保存方式 | 第64-65页 |
| ·最佳保存策略的优化 | 第65-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-73页 |
| ·对新鲜粪便DNA保存可行性的研究 | 第68-70页 |
| ·最佳保存策略的优化结果 | 第70-73页 |
| 3 讨论 | 第73-77页 |
| ·粪便DNA不能长期保存的原因 | 第73-74页 |
| ·各因素对粪便DNA质量的影响 | 第74-75页 |
| ·以DNA浓度和纯度评价保存效果 | 第75-77页 |
| 第五章 对影响粪便DNA提取的相关因素的探讨 | 第77-93页 |
| 1 引言 | 第77页 |
| 2 材料和方法 | 第77-82页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·主要仪器设备 | 第78页 |
| ·样品采集及保存 | 第78-79页 |
| ·取样方法、预处理及DNA提取 | 第79-81页 |
| ·正交分析 | 第81-82页 |
| 3 结果 | 第82-89页 |
| ·提取及扩增结果 | 第82-83页 |
| ·以产物纯度为考察目标分析结果 | 第83页 |
| ·以产物浓度为考察目标分析结果 | 第83-88页 |
| ·结论 | 第88-89页 |
| 4 讨论 | 第89-93页 |
| ·各因素对粪便DNA提取影响状况 | 第89-91页 |
| ·各研究因素的最佳水平 | 第91页 |
| ·小结 | 第91-93页 |
| 第六章 总结 | 第93-98页 |
| 参考文献 | 第98-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简介 | 第107-108页 |
| 附件 | 第108-118页 |
