中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第13-22页 |
1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其结构基因研究 | 第13-19页 |
·对虾白斑综合症病毒研究概况 | 第13-16页 |
·对虾白斑综合症病毒的发现 | 第13页 |
·对虾白斑综合症病症及组织病理学 | 第13页 |
·对虾白斑综合症病毒的形态特征及可能的感染过程 | 第13-14页 |
·对虾白斑综合症病毒的分子生物学研究现状 | 第14-16页 |
·对虾白斑综合症病毒结构蛋白的研究 | 第16-19页 |
2 本论文研究的内容和意义 | 第19-22页 |
第一部分 对虾白斑综合症病毒(WSSV)基因组细菌双杂交系统的构建 | 第22-34页 |
1 前言 | 第22-27页 |
·细菌双杂交系统 | 第22页 |
·特点和优点 | 第22-23页 |
·基本原理 | 第23-24页 |
·细菌双杂交系统的发展现状 | 第24-25页 |
·细菌双杂交系统的应用 | 第25-26页 |
·构建WSSV 基因组细菌双杂交系统的意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-28页 |
·材料 | 第27页 |
·方法 | 第27-28页 |
·WSSV 基因组DNA 随机片段的准备 | 第27页 |
·pBT 及pTRG 诱饵载体的准备 | 第27页 |
·WSSV基因组细菌双杂交pBT-wssv与pTRG-wssv库的构建 | 第27-28页 |
·菌落PCR鉴定插入片段的大小 | 第28页 |
·pBT-wssv与pTRG-wssv共转化 | 第28页 |
3 结果 | 第28-32页 |
·WSSV基因组DNA随机片段的准备 | 第28-29页 |
·pBT 及pTRG 诱饵载体的准备 | 第29页 |
·WSSV 基因组细菌双杂交pBT-wssv 与pTRG-wssv 库的构建 | 第29-31页 |
·WSSV 基因组细菌双杂交筛选 WSSV 中有相互作用的蛋白质 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
第二部分 对虾白斑综合症病毒核衣壳蛋白 VP664 的研究鉴定 | 第34-47页 |
1 前言 | 第34页 |
2 材料与方法 | 第34-40页 |
·材料 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-40页 |
·WSSV 完整病毒和核衣壳的制备 | 第35-36页 |
·vp664 的质谱分析 | 第36页 |
·vp664 的生物学信息分析 | 第36页 |
·基因的体外表达和蛋白质纯化 | 第36-38页 |
·多克隆抗体的制备 | 第38-39页 |
·Western blot 分析 | 第39页 |
·免疫共沉淀分析 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-45页 |
·vp664 基因及其编码产物的生物学信息分析 | 第40页 |
·pET-His-vp664n 和 pET-His-vp664c 重组表达质粒的构建 | 第40-42页 |
·VP664N,VP664C 在E.coli 中的表达和纯化 | 第42页 |
·Western blot 分析 | 第42-44页 |
·免疫共沉淀分析 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
第三部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白 VP41A 的功能研究 | 第47-57页 |
1 前言 | 第47页 |
2 材料与方法 | 第47-51页 |
·材料 | 第47页 |
·方法 | 第47-51页 |
·WSSV 完整病毒和核衣壳的制备 | 第47页 |
·VP41A 的质谱分析 | 第47-48页 |
·VP41A 的生物学信息分析 | 第48页 |
·基因的体外表达和蛋白质纯化 | 第48-50页 |
·多克隆抗体的制备 | 第50页 |
·Western blot 分析 | 第50页 |
·从螯虾血细胞裂解液中筛选与VP41A 有相互作用的蛋白质 | 第50-51页 |
3 结果 | 第51-55页 |
·vp41a 基因及其编码产物的生物学信息分析 | 第51页 |
·pET-His-vp41a 重组表达质粒的构建 | 第51-52页 |
·VP41A 在E.coli 中的表达和纯化 | 第52-53页 |
·Western blot 分析 | 第53-54页 |
·螯虾血细胞裂解液中筛选与 VP41A 有相互作用的蛋白质 | 第54页 |
·Nano-ESI-MS | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-68页 |
缩略词 | 第68-69页 |
附录 | 第69-80页 |
致谢 | 第80页 |