| 引言 | 第1-28页 |
| SARS研究进展 | 第28-44页 |
| 一 SARS发病 | 第28页 |
| 二 SARS发病机制 | 第28-30页 |
| 1 呼吸系统损伤 | 第28页 |
| 2 免疫系统损伤 | 第28-29页 |
| 3 多脏器损伤 | 第29-30页 |
| 4 肺纤维化 | 第30页 |
| 三 SARS-CoV | 第30-33页 |
| 1 SARS-CoV在冠状病毒属中的分类学地位 | 第30-31页 |
| 2 SARS-CoV的蛋白及其功能 | 第31-33页 |
| (1) SARS-CoV编码的主要结构蛋白及其功能 | 第31-32页 |
| (2) SARS-CoV编码的非结构蛋白及其功能 | 第32-33页 |
| (3) SARS-CoV受体 | 第33页 |
| 四 传染性非典型肺炎临床诊断标准(试行) | 第33-34页 |
| 五 卫生部：传染性非典型肺炎推荐治疗方案 | 第34-35页 |
| 六 预后 | 第35-36页 |
| 七 中医药对SARS认识 | 第36-38页 |
| 八 疫苗研究以及中医药抗病毒优势 | 第38-41页 |
| 九 中药抗戾饮的研究 | 第41-42页 |
| 十 呼吸道冠状病毒体内模型研究 | 第42-44页 |
| 第一章 抗戾饮体外抗呼吸道病毒实验研究 | 第44-51页 |
| 1 实验目的 | 第44页 |
| 2 实验材料 | 第44-45页 |
| ·实验细胞 | 第44页 |
| ·实验病毒株 | 第44页 |
| ·实验试剂 | 第44页 |
| ·实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验用药 | 第45页 |
| 3 实验方法 | 第45-48页 |
| ·细胞的培养 | 第45页 |
| ·病毒传代 | 第45页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第45-46页 |
| ·RSV、Ad3病毒的滴度测定 | 第45-46页 |
| ·FM1病毒的滴度测定 | 第46页 |
| ·药物细胞毒性作用的测定 | 第46-47页 |
| ·实验药物对MRC-5细胞的毒性测定 | 第46页 |
| ·实验药物对MDCK细胞的毒性测定 | 第46-47页 |
| ·药物的抗病毒实验 | 第47-48页 |
| ·药物在MRC-5细胞中抗RSV、Ad3活性的测定 | 第47页 |
| ·药物在MDCK细胞中抗FM1活性的测定 | 第47-48页 |
| ·治疗指数的计算：TI=TC_(50)／IC_(50) | 第48页 |
| 4 实验结果 | 第48-49页 |
| ·药物对两种细胞的毒性浓度(表1) | 第48页 |
| ·药物对病毒的半数抑制浓度(表2) | 第48-49页 |
| ·药物的治疗指数(表3) | 第49页 |
| 5 结论 | 第49页 |
| 6 附图(见论文后附图1～11) | 第49-51页 |
| 第二章 抗戾饮对呼吸道冠状病毒体内感染模型的影响 | 第51-95页 |
| 第一节 呼吸道冠状病毒——IBV的增殖与鉴定 | 第51-60页 |
| 前言 | 第51页 |
| 1 实验材料 | 第51-52页 |
| ·病毒 | 第51页 |
| ·实验鸡胚 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-55页 |
| ·病毒的增殖 | 第52页 |
| ·致鸡胚矮小化实验 | 第52页 |
| ·对新城疫病毒B1株(NDV-B1)干扰实验 | 第52-53页 |
| ·IBV基因组N基因的RT-PCR鉴定 | 第53-55页 |
| ·引物设计与合成 | 第53页 |
| ·病毒总RNA的抽提 | 第53-54页 |
| ·cDNA合成(RT) | 第54页 |
| ·N基因目的片断的PCR扩增 | 第54-55页 |
| 3 实验结果 | 第55-56页 |
| ·病毒的增殖 | 第55页 |
| ·致鸡胚矮化实验 | 第55页 |
| ·对NDV-B1株的干扰实验 | 第55-56页 |
| ·IBV基因组N基因的RT-PCR鉴定结果 | 第56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 第二节 呼吸道冠状病毒——IBV感染雏鸡模型研究 | 第60-71页 |
| 前言 | 第60页 |
| 1 实验材料 | 第60-61页 |
| ·病毒 | 第60页 |
| ·实验用动物 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60-61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| 2 实验方法 | 第61-64页 |
| ·人工致鸡感染鸡传染性支气管炎病毒模型建立 | 第61页 |
| ·观测指标 | 第61-64页 |
| ·一般观察及体重、肛温检测 | 第61-62页 |
| ·呼吸道症状观察与评分 | 第62页 |
| ·病理组织学检测 | 第62页 |
| ·鸡组织IBV RT-PCR检测 | 第62-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-67页 |
| ·一般情况与体重及体温的变化 | 第64-65页 |
| ·呼吸道症状观察与评分 | 第65-66页 |
| ·病理组织学检测 | 第66页 |
| ·IBV N基因的RT-PCR鉴定结果 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 第三节 抗戾饮对人工致雏鸡感染呼吸道冠状病毒的影响研究 | 第71-95页 |
| 前言 | 第71页 |
| 1 材料及造模方法 | 第71-73页 |
| ·药物 | 第72页 |
| ·毒种及实验用动物 | 第72页 |
| ·主要实验试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72-73页 |
| ·病毒模型制造、分组及给药 | 第73页 |
| 2 实验一 抗戾饮对人工致雏鸡感染IBV模型组织N基因相对表达量的影响 | 第73-86页 |
| ·实验方法 | 第73-76页 |
| ·造模、分组及给药方法： | 第73页 |
| ·实验观察及指标 | 第73页 |
| ·鸡组织IBV病毒实时荧光定量PCR测定 | 第73-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-86页 |
| ·Real-time PCR引物设计 | 第76-77页 |
| ·Real-time PCR循环参数的优化 | 第77-80页 |
| ·Real-time PCR读板温度的优化 | 第80-83页 |
| ·Real-time PCR重复性检测 | 第83-84页 |
| ·Real-time PCR标准曲线的构建与样本IBV N基因相对表达量的测定 | 第84-86页 |
| ·病理组织学检测 | 第86页 |
| 3 实验二 抗戾饮对人工致鸡感染雏鸡IBV模型的保护作用 | 第86-88页 |
| ·实验方法 | 第86-87页 |
| ·造模、分组及给药方法 | 第86页 |
| ·实验观察 | 第86页 |
| ·统计学处理 | 第86-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-88页 |
| ·一般观察 | 第87页 |
| ·发病率、死亡率、及死亡保护率结果 | 第87页 |
| ·体温变化结果 | 第87-88页 |
| 4 实验三 抗戾饮对人工致雏鸡感染IBV模型抗体形成的作用 | 第88-91页 |
| ·实验方法 | 第88-90页 |
| ·造模、分组及给药方法 | 第88-89页 |
| ·样本收集 | 第89页 |
| ·IBV抗体检测方法 | 第89-90页 |
| ·统计学处理 | 第90页 |
| ·结果及分析 | 第90-91页 |
| 5 实验四 抗戾饮对雏鸡的急性毒性实验 | 第91-92页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·药物 | 第91页 |
| ·动物 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91页 |
| ·实验结果及分析 | 第91-92页 |
| 6 讨论 | 第92-94页 |
| 7 结论 | 第94-95页 |
| 第三章 结语 | 第95-98页 |
| 1 已达到的目标 | 第95页 |
| ·体外抗病毒实验 | 第95页 |
| ·体内抗病毒实验 | 第95页 |
| 2 本课题的特点和创新性 | 第95-96页 |
| 3 本课题的不足之处 | 第96页 |
| 4 在读期间参与课题 | 第96页 |
| 5 在读期间发表的论文情况 | 第96-97页 |
| 6 获奖情况 | 第97-98页 |
| 文献综述一 实时荧光定量PCR的研究进展及应用 | 第98-107页 |
| 1 实时荧光定量PCR的原理 | 第98-103页 |
| ·荧光域值(threshold)的设定 | 第98页 |
| ·Ct值与起始模板的关系 | 第98-99页 |
| ·实时定量PCR的荧光模式 | 第99-103页 |
| 2 实时荧光定量PCR的定量方法 | 第103-104页 |
| 3 实时荧光定量PCR引物和探针设计要求 | 第104-105页 |
| 4 实时荧光定量PCR的优点与局限性 | 第105页 |
| 5 实时荧光定量PCR的应用 | 第105-106页 |
| 6 展望 | 第106-107页 |
| 文献综述二 鸡传染性支气管炎(IB)研究进展 | 第107-111页 |
| 1 IB概述 | 第107页 |
| 2 IBV的分子结构 | 第107-108页 |
| ·基因组结构 | 第107页 |
| ·病毒蛋白组成 | 第107-108页 |
| ·纤突(S)蛋白 | 第107-108页 |
| ·膜(M)蛋白 | 第108页 |
| ·核衣壳(N)蛋白 | 第108页 |
| 3 IB诊断方法 | 第108-110页 |
| 4 IBV发病与临床诱因 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-118页 |
| 附图 | 第118-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
