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苏云金芽孢杆菌vip3A基因鉴定、克隆及杀虫活性分析

1 引言第1-23页
   ·杀虫晶体蛋白(ICPs)第10-14页
     ·ICPs的类型第10页
     ·苏云金芽孢杆菌的cry基因分类及其鉴定第10-14页
   ·营养期杀虫蛋白(VIPs)及其分类与杀虫活性第14-17页
     ·Vip1A和Vip2A第14-15页
     ·Vip3A第15-17页
   ·VIPs的杀虫作用机理第17-19页
   ·VIPs应用前景第19-20页
   ·重要农业害虫甜菜夜蛾和棉铃虫第20-22页
   ·本论文研究的目的与意义第22-23页
2 材料与方法第23-31页
   ·材料及仪器第23-25页
     ·材料第23页
     ·试剂第23-24页
     ·仪器设备第24-25页
   ·研究方法第25-31页
     ·模板制备第25页
     ·PCR反应第25-26页
     ·酶切分析第26页
     ·E.coli质粒DNA提取第26页
     ·Bt质粒DNA的提取第26页
     ·Bt总DNA提取第26-27页
     ·琼脂糖凝胶电泳第27页
     ·DNA回收第27页
     ·连接反应第27页
     ·E.coli感受态细胞制备第27页
     ·E.coli的转化第27-28页
     ·序列测定及分析第28页
     ·vip3A基因在大肠杆菌中诱导表达第28页
     ·SDS-PAGE电泳第28-29页
     ·菌株杀虫活性测定第29页
     ·数据处理第29页
     ·cry1,cry2,cry9及cry1I基因的PCR-RFLP鉴定体系第29-31页
3 实验结果第31-65页
   ·Bt菌株vip3A基因的鉴定第31-49页
     ·vip3A基因的PCR-RFLP鉴定体系的建立第31-33页
     ·Bt菌株vip3A基因的鉴定第33-49页
   ·Bt菌株BtAL中全长vip3A基因的克隆第49-60页
     ·BtAL中cry和vip3A基因型鉴定第49-50页
     ·引物设计第50页
     ·全长vip3A基因的扩增及克隆第50-52页
     ·Vip3Aa19序列及同源性分析第52-58页
     ·vip3Aa19基因的表达第58页
     ·Vip3Aa19生物活性测定(甜菜夜蛾、棉铃虫、小菜蛾、玉米螟)第58-60页
   ·Bt菌株Bt41中vip3A基因片段的克隆第60-65页
     ·Bt41中cry和vip3A基因型鉴定第60-61页
     ·引物设计第61页
     ·vip3A基因片段的扩增及克隆第61-62页
     ·Vip3A部分序列及同源性分析第62-65页
4 讨论第65-67页
5 结论第67-68页
6 参考文献第68-75页
7 在读期间发表的学术论文第75-84页
8 作者简历第84-85页
9 致谢第85页

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