摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-34页 |
·栉孔扇贝养殖现状及面临问题 | 第9-11页 |
·栉孔扇贝养殖 | 第9页 |
·栉孔扇贝的大规模死亡 | 第9-11页 |
·无脊椎动物免疫防御机制 | 第11-16页 |
·先天性免疫与获得免疫的差异 | 第11-12页 |
·无脊椎动物免疫防御机制 | 第12-16页 |
·先天免疫的免疫识别策略 | 第16-17页 |
·模式识别蛋白 | 第17-19页 |
·C-型凝集素 | 第19-30页 |
·凝集素家族分类 | 第19-20页 |
·C-型凝集素的发现 | 第20页 |
·C-型凝集素的结构特征 | 第20-21页 |
·C-型凝集素的钙离子结合位点 | 第21-22页 |
·位点2 与配体的关系 | 第22-23页 |
·脊椎动物的C-型凝集素超家族 | 第23-24页 |
·C-型凝集素在免疫中的作用 | 第24-30页 |
·无脊椎动物C-型凝集素研究进展 | 第30-32页 |
·本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
·本研究的目的 | 第32-33页 |
·本研究的意义 | 第33-34页 |
第二章:材料与方法 | 第34-48页 |
·实验材料 | 第34-36页 |
·实验动物与RNA 提取 | 第34页 |
·动物血细胞的处理 | 第34页 |
·培养基和试剂的配置 | 第34-36页 |
·实验主要试剂 | 第36页 |
·实验所用主要仪器设备 | 第36页 |
·实验所用主要生物信息学处理软件 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-48页 |
·cDNA 文库的构建 | 第36-37页 |
·从cDNA 文库中扩增所需基因 | 第37页 |
·RNA 提取 | 第37-38页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第38-39页 |
·制备感受态细胞 | 第39-40页 |
·PCR 产物纯化 | 第40页 |
·连接 | 第40-41页 |
·转化 | 第41-42页 |
·重组载体的构建 | 第42-43页 |
·重组蛋白的表达 | 第43-44页 |
·重组蛋白的纯化与复性 | 第44-46页 |
·凝菌实验 | 第46-47页 |
·生物信息学分析 | 第47-48页 |
第三章:栉孔扇贝C-型凝集素CFLec-1 的克隆、RT-PCR 以及原核重组研究 | 第48-62页 |
·材料与方法 | 第48-52页 |
·实验动物的饲养、微生物刺激以及血淋巴的抽取 | 第48页 |
·cDNA 文库的构建以及EST 分析 | 第48页 |
·CFLec-1 cDNA 全长的克隆 | 第48-50页 |
·序列分析 | 第50页 |
·CFLec-1 的组织特异性表达研究 | 第50页 |
·CFLec-1 在血淋巴中的表达模式研究 | 第50页 |
·CFLec-1 的重组表达和重组蛋白纯化 | 第50-51页 |
·抑菌实验 | 第51页 |
·凝集活性实验 | 第51-52页 |
·结果 | 第52-59页 |
·EST 文库构建和全长cDNA 的克隆 | 第52-53页 |
·同源性分析 | 第53-54页 |
·CFLec-1 在扇贝组织中的分布 | 第54-55页 |
·微生物感染实验 | 第55-56页 |
·CFLec-1 的原核重组表达 | 第56-58页 |
·抑菌活性 | 第58页 |
·凝集活性检测 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-62页 |
第四章 栉孔扇贝其他C-型凝集素的研究 | 第62-73页 |
·材料与方法 | 第62页 |
·材料 | 第62页 |
·方法 | 第62页 |
·结果 | 第62-70页 |
·栉孔扇贝CFLec-2 的克隆与原核表达 | 第62-64页 |
·栉孔扇贝mCFLec-1 的克隆与原核表达 | 第64-67页 |
·栉孔扇贝mCFLec-2,3 的克隆与表达研究 | 第67-70页 |
·讨论 | 第70-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
致谢 | 第83页 |